CAJ | 학술논문

目的探讨生物力学因素与骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)单核苷酸多态性对颈椎后纵韧带骨化(ossification of the posterior longitudinal ligament,OPLL)成骨作用的影响,为进一步发现OPLL多因素共同致病的具体机制奠定基础.方法采集颈椎OPLL病变组手术减压过程中骨化部位的后纵韧带和颈椎外伤等手术减压过程中的正常对照组后纵韧带.利用PCR和直接测序法分析BMP2上2个单核苷酸多态性位点109T＞G(rs2273073),570A＞T(rs235768)基因型及等位基因型的分布.Masson三色染色观察组织学结构改变.免疫组织化学染色和Western blot法检测BMP2的分布和表达.用C3H10T1/2细胞做转染构建细胞模型:正常组、空载体组、BMP2野生型组、BMP2(rs2273073)单突变组、BMP2(rs235768)单突变组、BMP2(rs2273073,rs235768)双突变组.采用机械应力装置对接种于Flexercell板的细胞施加10％、0.5Hz的机械应力,持续加载24h.以同样接种于Flexereell板未施加机械应力的细胞作为对照组.采用Western blot法检测机械应力加载前后各组BMP2表达情况.结果 Masson三色染色组织学观察显示病变组有成骨结构改变,免疫组织化学染色和Western blot法显示病变组BMP2的表达增加.机械应力加载后,细胞转染模型BMP2(rs2273073)单突变组和BMP2(rs2273073,rs235768)双突变组的BMP2表达较未施加应力组明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 BMP2单核苷酸多态性位点109T＞G(rs2273073)的突变不仅能提高人们对OPLL的易感性,同时能提高OPLL患者对机械应力的敏感度,从而加速OPLL的进展.
목적 탐토생물역학인소여골형태발생단백-2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)단핵감산다태성대경추후종인대골화(ossification of the posterior longitudinal ligament,OPLL)성골작용적영향,위진일보발현OPLL다인소공동치병적구체궤제전정기출.방법 채집경추OPLL병변조수술감압과정중골화부위적후종인대화경추외상등수술감압과정중적정상대조조후종인대.이용PCR화직접측서법분석BMP2상2개단핵감산다태성위점109T＞G(rs2273073),570A＞T(rs235768)기인형급등위기인형적분포.Masson삼색염색관찰조직학결구개변.면역조직화학염색화Western blot법검측BMP2적분포화표체.용C3H10T1/2세포주전염구건세포모형:정상조、공재체조、BMP2야생형조、BMP2(rs2273073)단돌변조、BMP2(rs235768)단돌변조、BMP2(rs2273073,rs235768)쌍돌변조.채용궤계응력장치대접충우Flexercell판적세포시가10％、0.5Hz적궤계응력,지속가재24h.이동양접충우Flexereell판미시가궤계응력적세포작위대조조.채용Western blot법검측궤계응력가재전후각조BMP2표체정황.결과 Masson삼색염색조직학관찰현시병변조유성골결구개변,면역조직화학염색화Western blot법현시병변조BMP2적표체증가.궤계응력가재후,세포전염모형BMP2(rs2273073)단돌변조화BMP2(rs2273073,rs235768)쌍돌변조적BMP2표체교미시가응력조명현증가,차이구유통계학의의(P＜0.05).결론 BMP2단핵감산다태성위점109T＞G(rs2273073)적돌변불부능제고인문대OPLL적역감성,동시능제고OPLL환자대궤계응력적민감도,종이가속OPLL적진전.