西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2014年
10期
1967-1974
,共8页
余心怡%陈秀孔%张仕杰%章镇%渠慎春
餘心怡%陳秀孔%張仕傑%章鎮%渠慎春
여심이%진수공%장사걸%장진%거신춘
MhGlu%灰霉病%抗性%光合特性%烟草
MhGlu%灰黴病%抗性%光閤特性%煙草
MhGlu%회매병%항성%광합특성%연초
MhGlu%Botrytis cinerea%resistance%photosynthetic characteristics%tobacco
以湖北海棠盆栽及组培苗叶片为材料,经NaCl、PEG 6000及4℃下ABA处理后,通过RT PCR技术克隆了湖北海棠β-1,3葡聚糖酶基因Mh Glu;构建MhGlu基因的植物表达载体,通过农杆菌介导法将MhGlu基因转入烟草中,并通过PCR和RT PCR检测,成功获得了4个转基因株系T6、T8、T11和T18;以转基因烟草株系T6及T8和非转基因对照植株为材料,对MhGlu基因的功能进行了进一步分析.结果显示:(1)半定量qRT PCR显示,NaCl、PEG 6000及4℃下ABA处理均可以诱导湖北海棠盆栽及组培苗叶片MhGlu基因的表达;NaCl和PEG6000处理48 h内MhGlu基因的表达随处理时间延长逐渐增强,4℃下ABA处理的MhGlu基因表达量在4h时开始上调,12 h时略降低,48 h时又达到最大.(2)半定量RT PCR检测转基因烟草植株几个病程相关基因PRs的表达量,表明过表达的MhGlu基因诱导并增强了烟草病程相关基因NtPR1、NtPR3和NtPR5的表达.(3)用灰霉病侵染烟草叶片,转基因烟草株系T6、T8均表现出较强的抗灰霉病特性.(4)测定烟草植株光合特性参数,转MhGlu基因烟草株系的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)较对照组均显著提高,且T8的净光合速率和蒸腾速率均显著高于T6,而T8与T6的气孔导度差异不显著.MhGlu基因在烟草中的过量表达能诱导病程相关基因PRs的表达,激活了烟草的光合特性保护机制,提高了转MhGlu基因烟草植株的灰霉病抗性.
以湖北海棠盆栽及組培苗葉片為材料,經NaCl、PEG 6000及4℃下ABA處理後,通過RT PCR技術剋隆瞭湖北海棠β-1,3葡聚糖酶基因Mh Glu;構建MhGlu基因的植物錶達載體,通過農桿菌介導法將MhGlu基因轉入煙草中,併通過PCR和RT PCR檢測,成功穫得瞭4箇轉基因株繫T6、T8、T11和T18;以轉基因煙草株繫T6及T8和非轉基因對照植株為材料,對MhGlu基因的功能進行瞭進一步分析.結果顯示:(1)半定量qRT PCR顯示,NaCl、PEG 6000及4℃下ABA處理均可以誘導湖北海棠盆栽及組培苗葉片MhGlu基因的錶達;NaCl和PEG6000處理48 h內MhGlu基因的錶達隨處理時間延長逐漸增彊,4℃下ABA處理的MhGlu基因錶達量在4h時開始上調,12 h時略降低,48 h時又達到最大.(2)半定量RT PCR檢測轉基因煙草植株幾箇病程相關基因PRs的錶達量,錶明過錶達的MhGlu基因誘導併增彊瞭煙草病程相關基因NtPR1、NtPR3和NtPR5的錶達.(3)用灰黴病侵染煙草葉片,轉基因煙草株繫T6、T8均錶現齣較彊的抗灰黴病特性.(4)測定煙草植株光閤特性參數,轉MhGlu基因煙草株繫的淨光閤速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)和氣孔導度(Gs)較對照組均顯著提高,且T8的淨光閤速率和蒸騰速率均顯著高于T6,而T8與T6的氣孔導度差異不顯著.MhGlu基因在煙草中的過量錶達能誘導病程相關基因PRs的錶達,激活瞭煙草的光閤特性保護機製,提高瞭轉MhGlu基因煙草植株的灰黴病抗性.
이호북해당분재급조배묘협편위재료,경NaCl、PEG 6000급4℃하ABA처리후,통과RT PCR기술극륭료호북해당β-1,3포취당매기인Mh Glu;구건MhGlu기인적식물표체재체,통과농간균개도법장MhGlu기인전입연초중,병통과PCR화RT PCR검측,성공획득료4개전기인주계T6、T8、T11화T18;이전기인연초주계T6급T8화비전기인대조식주위재료,대MhGlu기인적공능진행료진일보분석.결과현시:(1)반정량qRT PCR현시,NaCl、PEG 6000급4℃하ABA처리균가이유도호북해당분재급조배묘협편MhGlu기인적표체;NaCl화PEG6000처리48 h내MhGlu기인적표체수처리시간연장축점증강,4℃하ABA처리적MhGlu기인표체량재4h시개시상조,12 h시략강저,48 h시우체도최대.(2)반정량RT PCR검측전기인연초식주궤개병정상관기인PRs적표체량,표명과표체적MhGlu기인유도병증강료연초병정상관기인NtPR1、NtPR3화NtPR5적표체.(3)용회매병침염연초협편,전기인연초주계T6、T8균표현출교강적항회매병특성.(4)측정연초식주광합특성삼수,전MhGlu기인연초주계적정광합속솔(Pn)、증등속솔(Tr)화기공도도(Gs)교대조조균현저제고,차T8적정광합속솔화증등속솔균현저고우T6,이T8여T6적기공도도차이불현저.MhGlu기인재연초중적과량표체능유도병정상관기인PRs적표체,격활료연초적광합특성보호궤제,제고료전MhGlu기인연초식주적회매병항성.
