食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2014年
19期
158-163
,共6页
新金分枝杆菌%底物耐受性%诱变育种%雄烯二酮%生物转化
新金分枝桿菌%底物耐受性%誘變育種%雄烯二酮%生物轉化
신금분지간균%저물내수성%유변육충%웅희이동%생물전화
Mycobacterium neoaurum%substrate-resistant strain%mutation breeding%androst-4-ene-3,17-dione%biotransformation
采用紫外、硫酸二乙酯复合诱变的方法对能选择性降解植物甾醇侧链的新金分支杆菌MN2进行诱变处理,利用梯度平板技术筛选高底物耐受性突变株,通过摇瓶发酵实验检测其转化性能,以期筛选出具有较高底物耐受性且转化生成雄烯二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD)能力提高的突变株.最终筛选到1株能在含高浓度底物平板上生长的AD突变株MN4.在底物甾醇投料量为20 g/L,摇瓶发酵144h时AD生成率为40.9％,较出发菌株提高了15.1％.经斜面接种连续传代5次,MN4突变株遗传性状稳定.对突变株MN4的发酵培养基进行优化,通过正交试验确定的最佳培养基配比为:葡萄糖1g/L,玉米浆25 g/L,磷酸二氢钠0.6 g/L,硝酸钠6.2 g/L,豆油160 g/L.根据该配方进行转化,得到AD的生成率为50.6％.
採用紫外、硫痠二乙酯複閤誘變的方法對能選擇性降解植物甾醇側鏈的新金分支桿菌MN2進行誘變處理,利用梯度平闆技術篩選高底物耐受性突變株,通過搖瓶髮酵實驗檢測其轉化性能,以期篩選齣具有較高底物耐受性且轉化生成雄烯二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD)能力提高的突變株.最終篩選到1株能在含高濃度底物平闆上生長的AD突變株MN4.在底物甾醇投料量為20 g/L,搖瓶髮酵144h時AD生成率為40.9％,較齣髮菌株提高瞭15.1％.經斜麵接種連續傳代5次,MN4突變株遺傳性狀穩定.對突變株MN4的髮酵培養基進行優化,通過正交試驗確定的最佳培養基配比為:葡萄糖1g/L,玉米漿25 g/L,燐痠二氫鈉0.6 g/L,硝痠鈉6.2 g/L,豆油160 g/L.根據該配方進行轉化,得到AD的生成率為50.6％.
채용자외、류산이을지복합유변적방법대능선택성강해식물치순측련적신금분지간균MN2진행유변처리,이용제도평판기술사선고저물내수성돌변주,통과요병발효실험검측기전화성능,이기사선출구유교고저물내수성차전화생성웅희이동(androst-4-ene-3,17-dione,AD)능력제고적돌변주.최종사선도1주능재함고농도저물평판상생장적AD돌변주MN4.재저물치순투료량위20 g/L,요병발효144h시AD생성솔위40.9％,교출발균주제고료15.1％.경사면접충련속전대5차,MN4돌변주유전성상은정.대돌변주MN4적발효배양기진행우화,통과정교시험학정적최가배양기배비위:포도당1g/L,옥미장25 g/L,린산이경납0.6 g/L,초산납6.2 g/L,두유160 g/L.근거해배방진행전화,득도AD적생성솔위50.6％.
