食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2014年
19期
23-27
,共5页
温文婷%夏白雪%张佳娣%聂远洋%李璐%官久强%罗晓林%孙群
溫文婷%夏白雪%張佳娣%聶遠洋%李璐%官久彊%囉曉林%孫群
온문정%하백설%장가제%섭원양%리로%관구강%라효림%손군
牦牛%双向电泳%蛋白提取%质谱鉴定
牦牛%雙嚮電泳%蛋白提取%質譜鑒定
모우%쌍향전영%단백제취%질보감정
yak%two-dimensional electrophoresis%protein extraction%mass spectrometry
为建立高原牦牛背最长肌蛋白质双向电泳的最佳条件,以牦牛背最长肌为研究对象,比较了超高速离心法、三氯乙酸-丙酮法、Tris-酚法及双裂解法4种方法对总蛋白质的提取效果.凝胶采用快速银染法染色,经双向电泳,用ImageMaster 2D Platinum软件分析蛋白点,并通过质谱对分离的蛋白点进行鉴定.结果表明:超高速离心法提取的样品蛋白质量浓度最高,杂质最少,蛋白点分离程度最好,蛋白点拖尾及产生纵横条纹的现象不明显,获得531个蛋白点,数量最多.该方法比其他3种方法更简单快捷,耗时最短,仅需2.5 h,而另3种方法至少需4～6 h甚至过夜反应.随机选取的6个蛋白点鉴定为5种蛋白,分别为肌球蛋白调节轻链2(1、2号点为同一蛋白)、脂肪酸结合蛋白、苹果酸脱氢酶、葡萄糖磷酸变位酶1、过氧化物氧还酶-1.本实验成功建立了牦牛肉双向电泳分析方法.
為建立高原牦牛揹最長肌蛋白質雙嚮電泳的最佳條件,以牦牛揹最長肌為研究對象,比較瞭超高速離心法、三氯乙痠-丙酮法、Tris-酚法及雙裂解法4種方法對總蛋白質的提取效果.凝膠採用快速銀染法染色,經雙嚮電泳,用ImageMaster 2D Platinum軟件分析蛋白點,併通過質譜對分離的蛋白點進行鑒定.結果錶明:超高速離心法提取的樣品蛋白質量濃度最高,雜質最少,蛋白點分離程度最好,蛋白點拖尾及產生縱橫條紋的現象不明顯,穫得531箇蛋白點,數量最多.該方法比其他3種方法更簡單快捷,耗時最短,僅需2.5 h,而另3種方法至少需4～6 h甚至過夜反應.隨機選取的6箇蛋白點鑒定為5種蛋白,分彆為肌毬蛋白調節輕鏈2(1、2號點為同一蛋白)、脂肪痠結閤蛋白、蘋果痠脫氫酶、葡萄糖燐痠變位酶1、過氧化物氧還酶-1.本實驗成功建立瞭牦牛肉雙嚮電泳分析方法.
위건립고원모우배최장기단백질쌍향전영적최가조건,이모우배최장기위연구대상,비교료초고속리심법、삼록을산-병동법、Tris-분법급쌍렬해법4충방법대총단백질적제취효과.응효채용쾌속은염법염색,경쌍향전영,용ImageMaster 2D Platinum연건분석단백점,병통과질보대분리적단백점진행감정.결과표명:초고속리심법제취적양품단백질량농도최고,잡질최소,단백점분리정도최호,단백점타미급산생종횡조문적현상불명현,획득531개단백점,수량최다.해방법비기타3충방법경간단쾌첩,모시최단,부수2.5 h,이령3충방법지소수4～6 h심지과야반응.수궤선취적6개단백점감정위5충단백,분별위기구단백조절경련2(1、2호점위동일단백)、지방산결합단백、평과산탈경매、포도당린산변위매1、과양화물양환매-1.본실험성공건립료모우육쌍향전영분석방법.
