中国草食动物科学
中國草食動物科學
중국초식동물과학
China Herbivores
2014年
z1期
109-111
,共3页
王红娜%孙洪新%张英杰%刘月琴
王紅娜%孫洪新%張英傑%劉月琴
왕홍나%손홍신%장영걸%류월금
绵羊%MSTN%RNA干扰%双元载体
綿羊%MSTN%RNA榦擾%雙元載體
면양%MSTN%RNA간우%쌍원재체
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为利用RNAi技术研究绵羊肌肉抑制素基因(myostatin,MSTN)的作用,设计针对MSTN编码序列的shRNA干扰片段,合成shRNA干扰序列M1、M2,各自制备成双链寡核苷酸,退火后形成的寡核苷酸双链克隆到Pgenesil载体.连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒扩增,质粒DNA抽提,使用Pst Ⅰ、kpn Ⅰ进行双酶切和DNA测序鉴定重组克隆.为了比较双元干扰载体与单元干扰载体的干扰效率,将干扰序列M1、M2连接到同一载体,进行一个载体编码两条shRNA的双元干扰片段载体的构建.经酶切及测序鉴定两种载体均构建成功.
為利用RNAi技術研究綿羊肌肉抑製素基因(myostatin,MSTN)的作用,設計針對MSTN編碼序列的shRNA榦擾片段,閤成shRNA榦擾序列M1、M2,各自製備成雙鏈寡覈苷痠,退火後形成的寡覈苷痠雙鏈剋隆到Pgenesil載體.連接產物轉化到感受態細胞,增菌,質粒擴增,質粒DNA抽提,使用Pst Ⅰ、kpn Ⅰ進行雙酶切和DNA測序鑒定重組剋隆.為瞭比較雙元榦擾載體與單元榦擾載體的榦擾效率,將榦擾序列M1、M2連接到同一載體,進行一箇載體編碼兩條shRNA的雙元榦擾片段載體的構建.經酶切及測序鑒定兩種載體均構建成功.
위이용RNAi기술연구면양기육억제소기인(myostatin,MSTN)적작용,설계침대MSTN편마서렬적shRNA간우편단,합성shRNA간우서렬M1、M2,각자제비성쌍련과핵감산,퇴화후형성적과핵감산쌍련극륭도Pgenesil재체.련접산물전화도감수태세포,증균,질립확증,질립DNA추제,사용Pst Ⅰ、kpn Ⅰ진행쌍매절화DNA측서감정중조극륭.위료비교쌍원간우재체여단원간우재체적간우효솔,장간우서렬M1、M2련접도동일재체,진행일개재체편마량조shRNA적쌍원간우편단재체적구건.경매절급측서감정량충재체균구건성공.
