重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2014年
24期
3228-3229,3230
,共3页
宋容%刘佳%吴立翔
宋容%劉佳%吳立翔
송용%류가%오립상
FIS H技术%荧光原位杂交%胃蛋白酶%H ER-2基因
FIS H技術%熒光原位雜交%胃蛋白酶%H ER-2基因
FIS H기술%형광원위잡교%위단백매%H ER-2기인
目的:探讨荧光原位杂交(FIS H )技术检测乳腺癌 H ER-2基因制片的最佳效果。方法本实验室对FIS H技术操作进行改进,采用胃蛋白酶滴加消化法替代了国内现行的蛋白酶K浸泡消化法,孵育温度37℃,时间12~15 min。切片充分洗涤也是实验成功的关键步骤,洗涤的时间、温度和pH值严格掌握,用配制洗涤液2倡SSC/0.3% NP-40 pH7.0代替了50%甲酰胺洗涤液,温度74℃,时间2~3 min。结果在荧光显微镜油镜放大100倍下观察,HER-2桔红色,CEP-17绿色,采用多个视野任意共选取40个细胞计数桔红色和绿色信号,得出桔红色信号/绿色信号(HER-2/CEP-17),如 HER-2/CEP-17<1.8,HER-2无扩增;如HER-2/CEP-17>2.2,HER-2扩增;如介入两者之间,重新选取40个细胞计数,红、绿、蓝信号明显。结论本实验室改进后FISH技术检测乳腺癌 HER-2基因实验操作更加稳定,该技术操作简单快速,杂交成功率最高,可提高诊断率。
目的:探討熒光原位雜交(FIS H )技術檢測乳腺癌 H ER-2基因製片的最佳效果。方法本實驗室對FIS H技術操作進行改進,採用胃蛋白酶滴加消化法替代瞭國內現行的蛋白酶K浸泡消化法,孵育溫度37℃,時間12~15 min。切片充分洗滌也是實驗成功的關鍵步驟,洗滌的時間、溫度和pH值嚴格掌握,用配製洗滌液2倡SSC/0.3% NP-40 pH7.0代替瞭50%甲酰胺洗滌液,溫度74℃,時間2~3 min。結果在熒光顯微鏡油鏡放大100倍下觀察,HER-2桔紅色,CEP-17綠色,採用多箇視野任意共選取40箇細胞計數桔紅色和綠色信號,得齣桔紅色信號/綠色信號(HER-2/CEP-17),如 HER-2/CEP-17<1.8,HER-2無擴增;如HER-2/CEP-17>2.2,HER-2擴增;如介入兩者之間,重新選取40箇細胞計數,紅、綠、藍信號明顯。結論本實驗室改進後FISH技術檢測乳腺癌 HER-2基因實驗操作更加穩定,該技術操作簡單快速,雜交成功率最高,可提高診斷率。
목적:탐토형광원위잡교(FIS H )기술검측유선암 H ER-2기인제편적최가효과。방법본실험실대FIS H기술조작진행개진,채용위단백매적가소화법체대료국내현행적단백매K침포소화법,부육온도37℃,시간12~15 min。절편충분세조야시실험성공적관건보취,세조적시간、온도화pH치엄격장악,용배제세조액2창SSC/0.3% NP-40 pH7.0대체료50%갑선알세조액,온도74℃,시간2~3 min。결과재형광현미경유경방대100배하관찰,HER-2길홍색,CEP-17록색,채용다개시야임의공선취40개세포계수길홍색화록색신호,득출길홍색신호/록색신호(HER-2/CEP-17),여 HER-2/CEP-17<1.8,HER-2무확증;여HER-2/CEP-17>2.2,HER-2확증;여개입량자지간,중신선취40개세포계수,홍、록、람신호명현。결론본실험실개진후FISH기술검측유선암 HER-2기인실험조작경가은정,해기술조작간단쾌속,잡교성공솔최고,가제고진단솔。