现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2014年
7期
1522-1526
,共5页
康志杰%崔嵩%李莉%高贝贝%黄丹%陈雪瑜%高源%杨岩%闫金松
康誌傑%崔嵩%李莉%高貝貝%黃丹%陳雪瑜%高源%楊巖%閆金鬆
강지걸%최숭%리리%고패패%황단%진설유%고원%양암%염금송
PML/RARα%标准品%基因筛查%实时荧光定量%诊断平台%急性早幼粒细胞白血病
PML/RARα%標準品%基因篩查%實時熒光定量%診斷平檯%急性早幼粒細胞白血病
PML/RARα%표준품%기인사사%실시형광정량%진단평태%급성조유립세포백혈병
PML/RARα%standard reference%fusion gene%RQ-PCR%diagnosis platform%APL
目的:针对90％以上的急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者表达的PML/RARα融合基因,设计引物及探针.对APL患者进行基因筛查,并构建PML/RARα环形质粒作为标准品,建立APL患者PML/RARα融合基因检测及微小残留病变监测的诊断平台,为APL患者的诊治提供分子生物学依据.方法:设计PML/RARα及ABL引物及Taqman探针,对APL患者进行基因筛查.并以PML/RARαL型及S型阳性的APL患者cDNA为模板,应用PCR技术扩增出453bp和550bp基因片段,构建pMD 18T-PML/RARα(L)及pMD 18T-PML/RARα(S)标准品.实时荧光定量(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)技术对该基因转录本水平的变化情况进行监测.结果:成功构建pMD 18T-PML/RARα质粒标准品,应用RQ-PCR技术,以ABL为内参,应用Taqman探针法,对APL患者标本进行检测,技术可行,数据稳定.结论:成功构建APL融合基因检测及微小残留病变监测的诊断平台,应用于临床病人的基因诊断,为APL的诊治提供了可靠的分子依据.
目的:針對90％以上的急性早幼粒細胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者錶達的PML/RARα融閤基因,設計引物及探針.對APL患者進行基因篩查,併構建PML/RARα環形質粒作為標準品,建立APL患者PML/RARα融閤基因檢測及微小殘留病變鑑測的診斷平檯,為APL患者的診治提供分子生物學依據.方法:設計PML/RARα及ABL引物及Taqman探針,對APL患者進行基因篩查.併以PML/RARαL型及S型暘性的APL患者cDNA為模闆,應用PCR技術擴增齣453bp和550bp基因片段,構建pMD 18T-PML/RARα(L)及pMD 18T-PML/RARα(S)標準品.實時熒光定量(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)技術對該基因轉錄本水平的變化情況進行鑑測.結果:成功構建pMD 18T-PML/RARα質粒標準品,應用RQ-PCR技術,以ABL為內參,應用Taqman探針法,對APL患者標本進行檢測,技術可行,數據穩定.結論:成功構建APL融閤基因檢測及微小殘留病變鑑測的診斷平檯,應用于臨床病人的基因診斷,為APL的診治提供瞭可靠的分子依據.
목적:침대90％이상적급성조유립세포백혈병(acute promyelocytic leukemia,APL)환자표체적PML/RARα융합기인,설계인물급탐침.대APL환자진행기인사사,병구건PML/RARα배형질립작위표준품,건립APL환자PML/RARα융합기인검측급미소잔류병변감측적진단평태,위APL환자적진치제공분자생물학의거.방법:설계PML/RARα급ABL인물급Taqman탐침,대APL환자진행기인사사.병이PML/RARαL형급S형양성적APL환자cDNA위모판,응용PCR기술확증출453bp화550bp기인편단,구건pMD 18T-PML/RARα(L)급pMD 18T-PML/RARα(S)표준품.실시형광정량(real-time quantitative PCR,RQ-PCR)기술대해기인전록본수평적변화정황진행감측.결과:성공구건pMD 18T-PML/RARα질립표준품,응용RQ-PCR기술,이ABL위내삼,응용Taqman탐침법,대APL환자표본진행검측,기술가행,수거은정.결론:성공구건APL융합기인검측급미소잔류병변감측적진단평태,응용우림상병인적기인진단,위APL적진치제공료가고적분자의거.
