安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
24期
8099-8101,8166
,共4页
王春生%李咏乐%仇雨歌%朴善花%安铁洙
王春生%李詠樂%仇雨歌%樸善花%安鐵洙
왕춘생%리영악%구우가%박선화%안철수
山羊%乳腺特异表达载体%Brazzein基因%转基因细胞
山羊%乳腺特異錶達載體%Brazzein基因%轉基因細胞
산양%유선특이표체재체%Brazzein기인%전기인세포
Goat%Mammary gland specific expression vector%Brazzein gene%Transgenic cell
[目的]建立通过山羊乳汁获取甜味蛋白Brazzein的方法.[方法]将前期工作中构建的Brazzein基因山羊乳腺特异表达载体STP-pBC1进行线性化,采用脂质体法转染山羊成纤维细胞,以期获得转基因阳性细胞.[结果]采用脂质体法转染山羊成纤维细胞后,通过最适G418浓度(400 μg/ml)筛选获得转基因阳性细胞;转基因阳性细胞形态呈现梭形且核仁清晰,其生长曲线呈现正常的“S”;转基因阳性细胞经冷冻复苏后,仍呈现与冷冻前新鲜转基因细胞相似的形态和生长曲线;PCR鉴定结果表明,STP-pBC1已整合入转基因细胞的基因组中.[结论]成功获得乳腺特异的转甜味蛋白基因Brazzein的山羊成纤维细胞株.
[目的]建立通過山羊乳汁穫取甜味蛋白Brazzein的方法.[方法]將前期工作中構建的Brazzein基因山羊乳腺特異錶達載體STP-pBC1進行線性化,採用脂質體法轉染山羊成纖維細胞,以期穫得轉基因暘性細胞.[結果]採用脂質體法轉染山羊成纖維細胞後,通過最適G418濃度(400 μg/ml)篩選穫得轉基因暘性細胞;轉基因暘性細胞形態呈現梭形且覈仁清晰,其生長麯線呈現正常的“S”;轉基因暘性細胞經冷凍複囌後,仍呈現與冷凍前新鮮轉基因細胞相似的形態和生長麯線;PCR鑒定結果錶明,STP-pBC1已整閤入轉基因細胞的基因組中.[結論]成功穫得乳腺特異的轉甜味蛋白基因Brazzein的山羊成纖維細胞株.
[목적]건립통과산양유즙획취첨미단백Brazzein적방법.[방법]장전기공작중구건적Brazzein기인산양유선특이표체재체STP-pBC1진행선성화,채용지질체법전염산양성섬유세포,이기획득전기인양성세포.[결과]채용지질체법전염산양성섬유세포후,통과최괄G418농도(400 μg/ml)사선획득전기인양성세포;전기인양성세포형태정현사형차핵인청석,기생장곡선정현정상적“S”;전기인양성세포경냉동복소후,잉정현여냉동전신선전기인세포상사적형태화생장곡선;PCR감정결과표명,STP-pBC1이정합입전기인세포적기인조중.[결론]성공획득유선특이적전첨미단백기인Brazzein적산양성섬유세포주.
