CAJ | 학술논문

目的：研究 siRNA 沉默转化生长因子β激活激酶（TAK1）基因对胃癌细胞 BGC823增殖及药物敏感性的影响，初探其相关作用机制。方法用 Lipofectamine 2000将 TAK1 siRNA（siRNA-TAK1组）及阴性对照 siRNA（siRNA-control 组）序列转入细胞 BGC823中，用 MTT 法检测两组细胞增殖能力的变化，同时检测其对多西紫杉醇（docetaxel艾素）、奥沙利铂（L-OHP）、5-氟尿嘧啶（5-FU）的敏感性的变化，应用 western blot 检测细胞 TAK1、COX-2、Bcl-2、p-gp 蛋白的表达。结果 siRNA-TAK1组细胞增殖能力显著低于 siRNA-control 组（P ＜0．05），siRNA-TAK1组对艾素、L-OHP、5-FU 的24 h、48 h、72 h IC50分别为（mg /L）：1．31±0．08、13．00±0．41、17．14±0．91；0．78±0．03、4．92±0．16、5．80±0．58；17．14±0．91、5．80±0．58、3．67±0．19；siRNA-control 组分别为（mg/L）：2．74±0．17、26．55±0．82、39．58±1．94；14．42±1．19、10．45±0．40、1．66±0．11；0．99±0．09、4．87±0．32、7．94±0．43，siRNA-TAK1组的 IC50明显低于 siRNA-control 组（P ＜0．05），转染72 h 后 siRNA-control 组 TAK1、COX-2、Bcl-2、p-gp 蛋白的表达显著低于 siRNA-control 组（P ＜0．05）。结论沉默 TAK1蛋白表达可能通过调节 COX-2信号通路降低细胞增殖能力，增强细胞 BGC823的药物敏感性。
목적：연구 siRNA 침묵전화생장인자β격활격매（TAK1）기인대위암세포 BGC823증식급약물민감성적영향，초탐기상관작용궤제。방법용 Lipofectamine 2000장 TAK1 siRNA（siRNA-TAK1조）급음성대조 siRNA（siRNA-control 조）서렬전입세포 BGC823중，용 MTT 법검측량조세포증식능력적변화，동시검측기대다서자삼순（docetaxel애소）、오사리박（L-OHP）、5-불뇨밀정（5-FU）적민감성적변화，응용 western blot 검측세포 TAK1、COX-2、Bcl-2、p-gp 단백적표체。결과 siRNA-TAK1조세포증식능력현저저우 siRNA-control 조（P ＜0．05），siRNA-TAK1조대애소、L-OHP、5-FU 적24 h、48 h、72 h IC50분별위（mg /L）：1．31±0．08、13．00±0．41、17．14±0．91；0．78±0．03、4．92±0．16、5．80±0．58；17．14±0．91、5．80±0．58、3．67±0．19；siRNA-control 조분별위（mg/L）：2．74±0．17、26．55±0．82、39．58±1．94；14．42±1．19、10．45±0．40、1．66±0．11；0．99±0．09、4．87±0．32、7．94±0．43，siRNA-TAK1조적 IC50명현저우 siRNA-control 조（P ＜0．05），전염72 h 후 siRNA-control 조 TAK1、COX-2、Bcl-2、p-gp 단백적표체현저저우 siRNA-control 조（P ＜0．05）。결론침묵 TAK1단백표체가능통과조절 COX-2신호통로강저세포증식능력，증강세포 BGC823적약물민감성。
Objective To determine the influence and mechanism of TAK1 gene silencing by RNA interference on prolifera-tion and drug sensitivity of BGC823 cells.Methods siRNA targeting TAK1 mRNA and negative control were transfected into BGC823 cells by Lipofectamine 2000.Cell proliferation ability and drug sensitivity to docetaxel,oxaliplatin and 5-fluoroura-cil were detected by MTT assay.The expression of AK1,COX-2,bcl-2 and p-gp were determined by Western blot.Results The proliferation ability of SiRNA-TAK1 cells was significantly lower than that of siRNA-control cells.The IC50 of siRNA-TAK1 cells to docetaxel,oxaliplatin and 5-fluorouracil are1.31 ±0.08,13.00 ±0.41,17.14 ±0.91;0.78 ±0.03,4.92 ± 0.16,5.80 ±0.58;17.14 ±0.91,5.80 ±0.58,3.67 ±0.19 at 24 h,48 h,72 h.The IC50 of negative control cells to do-cetaxel,oxaliplatin and 5-fluorouracil are 2.74 ±0.17,26.55 ±0.82,39.58 ±1.94;14.42 ±1.19,10.45 ±0.40,1.66 ± 0.11;0.99 ±0.09,4.87 ±0.32,7.94 ±0.43.The IC50 of siRNA-TAK1 cells is significantly lower than the siRNA-control (P <0.05).The expression of AK1,COX-2,bcl-2,p-gp of siRNA-TAK1 cells is lower than the siRNA-control (P <0.05) after72h post-transfection.Conclusion Silencing the TAK1 can inhibit proliferation and enhance the drug sensitivity of BGC823 through the COX-2 signal pathway.