世界科技研究与发展
世界科技研究與髮展
세계과기연구여발전
WORLD SCI-TECH R & D
2014年
4期
402-406
,共5页
吕海迪%周逢海%李海元%马玉磊%周川%王养民%郭秀全
呂海迪%週逢海%李海元%馬玉磊%週川%王養民%郭秀全
려해적%주봉해%리해원%마옥뢰%주천%왕양민%곽수전
转化生长因子 β激活激酶%siRNA%药物敏感性%增殖
轉化生長因子 β激活激酶%siRNA%藥物敏感性%增殖
전화생장인자 β격활격매%siRNA%약물민감성%증식
transforming growth factor-βactivated kinase%siRNA%drug sensitivity%proliferation
目的：研究 siRNA 沉默转化生长因子β激活激酶（TAK1）基因对前列腺癌细胞 DU145增殖及药物敏感性的影响，对其相关作用机制进行初步初探。方法用 Lipofectamine 2000将 TAK1 siRNA 及阴性对照 siRNA 序列转入细胞 DU145中，用 MTT 法检测两组细胞增殖能力的变化，同时检测其对多西紫杉醇（艾素）、奥沙利铂（L-OHP）、5-氟尿嘧啶（5-FU）的敏感性的变化，应用 western blot 检测细胞 TAK1、COX-2、bcl-2及 JNK 的表达。结果 siRNA-TAK1组细胞增殖能力显著低于 siRNA-control 组（P ＜0．05）。siRNA-TAK1组，艾素、L-OHP 和5-FU 的24 h、48、72H IC50分别为（mg·L -1）：0．52±0．02、0．35±0．03、0．17±0．01；1．79±0．10、0．99±0．05、0．57±0．04和53．41±2．15、25．91±1．55、10．89±0．81；siRNA-control 组分别为（mg·L -1）：0．62±0．04、0．32±0．02；2．10±0．05、0．63±0．04和28．31±1．14、13．73±0．82、5．77±0．43。siRNA-TAK1组的 IC50均明显低于 siRNA-control 组（P ＜0．05），转染48 h 后 siRNA-TAK1组 TAK1、COX-2、bcl-2蛋白的表达显著低于 siRNA-control 组（P ＜0．05）。结论干扰 TAK1蛋白表达抑制 TGF-β和 COX-2信号通路可能是降低细胞增殖能力和增强细胞 DU145药物敏感性的一个机制。
目的：研究 siRNA 沉默轉化生長因子β激活激酶（TAK1）基因對前列腺癌細胞 DU145增殖及藥物敏感性的影響，對其相關作用機製進行初步初探。方法用 Lipofectamine 2000將 TAK1 siRNA 及陰性對照 siRNA 序列轉入細胞 DU145中，用 MTT 法檢測兩組細胞增殖能力的變化，同時檢測其對多西紫杉醇（艾素）、奧沙利鉑（L-OHP）、5-氟尿嘧啶（5-FU）的敏感性的變化，應用 western blot 檢測細胞 TAK1、COX-2、bcl-2及 JNK 的錶達。結果 siRNA-TAK1組細胞增殖能力顯著低于 siRNA-control 組（P ＜0．05）。siRNA-TAK1組，艾素、L-OHP 和5-FU 的24 h、48、72H IC50分彆為（mg·L -1）：0．52±0．02、0．35±0．03、0．17±0．01；1．79±0．10、0．99±0．05、0．57±0．04和53．41±2．15、25．91±1．55、10．89±0．81；siRNA-control 組分彆為（mg·L -1）：0．62±0．04、0．32±0．02；2．10±0．05、0．63±0．04和28．31±1．14、13．73±0．82、5．77±0．43。siRNA-TAK1組的 IC50均明顯低于 siRNA-control 組（P ＜0．05），轉染48 h 後 siRNA-TAK1組 TAK1、COX-2、bcl-2蛋白的錶達顯著低于 siRNA-control 組（P ＜0．05）。結論榦擾 TAK1蛋白錶達抑製 TGF-β和 COX-2信號通路可能是降低細胞增殖能力和增彊細胞 DU145藥物敏感性的一箇機製。
목적：연구 siRNA 침묵전화생장인자β격활격매（TAK1）기인대전렬선암세포 DU145증식급약물민감성적영향，대기상관작용궤제진행초보초탐。방법용 Lipofectamine 2000장 TAK1 siRNA 급음성대조 siRNA 서렬전입세포 DU145중，용 MTT 법검측량조세포증식능력적변화，동시검측기대다서자삼순（애소）、오사리박（L-OHP）、5-불뇨밀정（5-FU）적민감성적변화，응용 western blot 검측세포 TAK1、COX-2、bcl-2급 JNK 적표체。결과 siRNA-TAK1조세포증식능력현저저우 siRNA-control 조（P ＜0．05）。siRNA-TAK1조，애소、L-OHP 화5-FU 적24 h、48、72H IC50분별위（mg·L -1）：0．52±0．02、0．35±0．03、0．17±0．01；1．79±0．10、0．99±0．05、0．57±0．04화53．41±2．15、25．91±1．55、10．89±0．81；siRNA-control 조분별위（mg·L -1）：0．62±0．04、0．32±0．02；2．10±0．05、0．63±0．04화28．31±1．14、13．73±0．82、5．77±0．43。siRNA-TAK1조적 IC50균명현저우 siRNA-control 조（P ＜0．05），전염48 h 후 siRNA-TAK1조 TAK1、COX-2、bcl-2단백적표체현저저우 siRNA-control 조（P ＜0．05）。결론간우 TAK1단백표체억제 TGF-β화 COX-2신호통로가능시강저세포증식능력화증강세포 DU145약물민감성적일개궤제。
Objective To determine the influence and mechanism of TAK1 gene silencing by RNA interferienceon on prolifer-ation and drug sensitivity of DU145 cells.Methods TAK1 siRNA and negative control were transfected into DU145 cells by Lipofectamine 2000.Cell proliferation ability and drug sensitivity to docetaxel,oxaliplatin and 5-fluorouracil were detected by MTT assay.The expression of AK1,COX-2 and bcl-2 were determined by RT-PCR and Western blot.Results Compared to the control group,cell proliferation was significantly decreased in DU145 cell transfected with TAK1 siRNA.The IC50 of docetaxel,oxaliplatin and 5-fluorouracil in siRNA-TAK1 group are(mg.L -1 ):0.52 ±0.02、0.35 ±0.03、0.17 ±0.01;1. 79 ±0.10、0.99 ±0.05、0.57 ±0.04 和 53.41 ±2.15、25.91 ±1.55、10.89 ±0.81at 24 h,48 h,72 h respectively.The IC50 of in negative control group are(mg.L -1 ):0.62 ±0.04、0.32 ±0.02;2.10 ±0.05、0.63 ±0.04 和 28.31 ±1.14、13.73 ±0.82、5.77 ±0.43.The IC50 of siRNA-TAK1 group is significantly lower than the siRNA-control group (P <0.05).The expression of AK1,COX-2,JNK and bcl-2 of siRNA-TAK1 group is lower than the siRNA-control group (P <0.05)at 48 h after transfected.Conclusion TAK1 siRNA can inhibit TGF-βand COX-2 signal pathway,which may be one of mechanisms of reduce proliferation and drug resistance of DU145 cell.
