分析测试学报
分析測試學報
분석측시학보
JOURNAL OF INSTRUMENTAL ANALYSIS
2014年
8期
934-939
,共6页
董爱军%张英春%杨鑫%张华%井晶
董愛軍%張英春%楊鑫%張華%井晶
동애군%장영춘%양흠%장화%정정
反相高效液相色谱/荧光法%硫胺素及其磷酸酯%血浆%红细胞%尿液
反相高效液相色譜/熒光法%硫胺素及其燐痠酯%血漿%紅細胞%尿液
반상고효액상색보/형광법%류알소급기린산지%혈장%홍세포%뇨액
reversed phase high performance liquid chromatography-fluorescence detection (RP-HPLC/FLD)%thiamine and its phosphate ester%plasma%erythrocytes%urine
建立了同时测定血浆、红细胞、尿液中硫胺素(T)、一磷酸硫胺素(TMP)、二磷酸硫胺素(TDP)的柱前衍生/反相高效液相色谱-荧光检测法.样品经高氯酸除蛋白,铁氰化钾衍生后,采用反相色谱柱分离,荧光检测器测定,外标法定量.色谱柱为C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm i.d.),流动相为0.2 mol/L KH2PO4溶液(pH 7.0,含0.000 3 mol/L四丁基氢氧化铵)-甲醇和甲醇-水,采用梯度程序进行洗脱,流速为0.8mL/min.荧光检测器激发波长为365 nm,发射波长为435 nm.结果表明:T,TMP在0.5～ 20.0μg/L,TDP在5.0 ～ 200.0 μg/L质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数分别为0.99,0.98,0.99.T,TMP,TDP的平均回收率为86.8％～110.2％,相对标准偏差(RSDs)为2.5％～10.9％.3种化合物在血浆及红细胞中的检出限(LODs)为0.03～0.35 μg/L,定量下限(LOQs)为0.09～1.18 μg/L.T在尿液中的检出限(LODs)为1.58μg/L,定量下限(LOQs)为5.26 μg/L.该方法的准确度和精密度均较高,能够满足临床检测和科研需要.
建立瞭同時測定血漿、紅細胞、尿液中硫胺素(T)、一燐痠硫胺素(TMP)、二燐痠硫胺素(TDP)的柱前衍生/反相高效液相色譜-熒光檢測法.樣品經高氯痠除蛋白,鐵氰化鉀衍生後,採用反相色譜柱分離,熒光檢測器測定,外標法定量.色譜柱為C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm i.d.),流動相為0.2 mol/L KH2PO4溶液(pH 7.0,含0.000 3 mol/L四丁基氫氧化銨)-甲醇和甲醇-水,採用梯度程序進行洗脫,流速為0.8mL/min.熒光檢測器激髮波長為365 nm,髮射波長為435 nm.結果錶明:T,TMP在0.5～ 20.0μg/L,TDP在5.0 ～ 200.0 μg/L質量濃度範圍內呈良好的線性關繫,相關繫數分彆為0.99,0.98,0.99.T,TMP,TDP的平均迴收率為86.8％～110.2％,相對標準偏差(RSDs)為2.5％～10.9％.3種化閤物在血漿及紅細胞中的檢齣限(LODs)為0.03～0.35 μg/L,定量下限(LOQs)為0.09～1.18 μg/L.T在尿液中的檢齣限(LODs)為1.58μg/L,定量下限(LOQs)為5.26 μg/L.該方法的準確度和精密度均較高,能夠滿足臨床檢測和科研需要.
건립료동시측정혈장、홍세포、뇨액중류알소(T)、일린산류알소(TMP)、이린산류알소(TDP)적주전연생/반상고효액상색보-형광검측법.양품경고록산제단백,철청화갑연생후,채용반상색보주분리,형광검측기측정,외표법정량.색보주위C18주(250 mm×4.6 mm,5μm i.d.),류동상위0.2 mol/L KH2PO4용액(pH 7.0,함0.000 3 mol/L사정기경양화안)-갑순화갑순-수,채용제도정서진행세탈,류속위0.8mL/min.형광검측기격발파장위365 nm,발사파장위435 nm.결과표명:T,TMP재0.5～ 20.0μg/L,TDP재5.0 ～ 200.0 μg/L질량농도범위내정량호적선성관계,상관계수분별위0.99,0.98,0.99.T,TMP,TDP적평균회수솔위86.8％～110.2％,상대표준편차(RSDs)위2.5％～10.9％.3충화합물재혈장급홍세포중적검출한(LODs)위0.03～0.35 μg/L,정량하한(LOQs)위0.09～1.18 μg/L.T재뇨액중적검출한(LODs)위1.58μg/L,정량하한(LOQs)위5.26 μg/L.해방법적준학도화정밀도균교고,능구만족림상검측화과연수요.
