安徽医科大学学报
安徽醫科大學學報
안휘의과대학학보
ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
2014年
8期
1062-1067
,共6页
占书箱%黄成%马陶陶%陈培杰%李俊
佔書箱%黃成%馬陶陶%陳培傑%李俊
점서상%황성%마도도%진배걸%리준
肝星状细胞株%p70S6K%siRNA%雷帕霉素%肝纤维化
肝星狀細胞株%p70S6K%siRNA%雷帕黴素%肝纖維化
간성상세포주%p70S6K%siRNA%뢰파매소%간섬유화
HSC-T6%p70S6K%small interfering RNA%Rapamycin%hepatic fibrosis
目的 研究抑制核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(p70S6K)的表达对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)增殖活化的影响.方法 建立CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,观察磷酸化p70S6K在纤维化肝组织中的表达变化;利用雷帕霉素抑制p70S6K蛋白表达,及靶向p70S6K基因的siRNA预处理HSC-T6,再添加重组小鼠血小板衍生生长因子(PDGFBB)诱导,观察HSC-T6的增殖活化情况;利用Western blot、RT-PCR检测p70S6K、P-p70S6K、α-SMA、Collagen Ⅰ的蛋白和基因表达水平.结果 CCl4诱导大鼠肝纤维化模型组磷酸化p70S6K蛋白明显升高;雷帕霉素预处理HSC-T6,明显降低了p70S6K的磷酸化水平,并抑制了PDGF-BB诱导的细胞增殖及α-SMA、Collagen Ⅰ的表达;siRNA转染HSC-T6,在基因和蛋白水平抑制了p70S6K的表达,同时减少了PDGF-BB诱导的α-SMA、Collagen Ⅰ、P-p70S6K的表达.结论 用siRNA和雷帕霉素阻断p70S6K的表达,在一定程度上可以抑制HSC-T6的增殖和活化,为肝纤维化的防治研究提供新的思路和靶点.
目的 研究抑製覈糖體40S小亞基S6蛋白激酶(p70S6K)的錶達對大鼠肝星狀細胞株(HSC-T6)增殖活化的影響.方法 建立CCl4誘導大鼠肝纖維化模型,觀察燐痠化p70S6K在纖維化肝組織中的錶達變化;利用雷帕黴素抑製p70S6K蛋白錶達,及靶嚮p70S6K基因的siRNA預處理HSC-T6,再添加重組小鼠血小闆衍生生長因子(PDGFBB)誘導,觀察HSC-T6的增殖活化情況;利用Western blot、RT-PCR檢測p70S6K、P-p70S6K、α-SMA、Collagen Ⅰ的蛋白和基因錶達水平.結果 CCl4誘導大鼠肝纖維化模型組燐痠化p70S6K蛋白明顯升高;雷帕黴素預處理HSC-T6,明顯降低瞭p70S6K的燐痠化水平,併抑製瞭PDGF-BB誘導的細胞增殖及α-SMA、Collagen Ⅰ的錶達;siRNA轉染HSC-T6,在基因和蛋白水平抑製瞭p70S6K的錶達,同時減少瞭PDGF-BB誘導的α-SMA、Collagen Ⅰ、P-p70S6K的錶達.結論 用siRNA和雷帕黴素阻斷p70S6K的錶達,在一定程度上可以抑製HSC-T6的增殖和活化,為肝纖維化的防治研究提供新的思路和靶點.
목적 연구억제핵당체40S소아기S6단백격매(p70S6K)적표체대대서간성상세포주(HSC-T6)증식활화적영향.방법 건립CCl4유도대서간섬유화모형,관찰린산화p70S6K재섬유화간조직중적표체변화;이용뢰파매소억제p70S6K단백표체,급파향p70S6K기인적siRNA예처리HSC-T6,재첨가중조소서혈소판연생생장인자(PDGFBB)유도,관찰HSC-T6적증식활화정황;이용Western blot、RT-PCR검측p70S6K、P-p70S6K、α-SMA、Collagen Ⅰ적단백화기인표체수평.결과 CCl4유도대서간섬유화모형조린산화p70S6K단백명현승고;뢰파매소예처리HSC-T6,명현강저료p70S6K적린산화수평,병억제료PDGF-BB유도적세포증식급α-SMA、Collagen Ⅰ적표체;siRNA전염HSC-T6,재기인화단백수평억제료p70S6K적표체,동시감소료PDGF-BB유도적α-SMA、Collagen Ⅰ、P-p70S6K적표체.결론 용siRNA화뢰파매소조단p70S6K적표체,재일정정도상가이억제HSC-T6적증식화활화,위간섬유화적방치연구제공신적사로화파점.
