现代消化及介入诊疗
現代消化及介入診療
현대소화급개입진료
MODERN DIGESTION & INTERVENTION
2014年
4期
272-275
,共4页
毕婉蓉%邢海林%杨长青%吴艳红%金彩霞
畢婉蓉%邢海林%楊長青%吳豔紅%金綵霞
필완용%형해림%양장청%오염홍%금채하
肝纤维化%分泌型卷曲相关蛋白%上皮-间质转换
肝纖維化%分泌型捲麯相關蛋白%上皮-間質轉換
간섬유화%분비형권곡상관단백%상피-간질전환
目的:探讨分泌型卷曲相关蛋白(secreted frizzled related protein, SFRP)对实验性小鼠肝纤维化(Hepatic fibro-sis, HF)的抑制作用。方法建立小鼠CCl4诱导HF模型,随机分为正常对照组、HF模型组与SFRP2 shRNA处理组。小鼠肝细胞中获得总 RNA,经RT-PCR转化 cDNA,构建pcDNA1.0/SFRP2载体 HF 肝细胞并克隆获得 pSilencer-U6neo/SFRP2 shRNA稳定转染肝细胞。采用Westernblot、免疫荧光显微镜及激光共聚焦定位分析观察SFRP2 shRNA抑制HF作用。结果免疫双荧光显示SFRP2 shRNA抑制HF小鼠肝细胞FSP-1 mRNA、Smad2 mRNA、Wnt3A mRNA的表达;经RT-PCR及Western blot分析支持SFRP2 shRNA抑制HF小鼠肝细胞上皮-间质转换(Epithelial-mesenchymal tran-sitions, EMT)的发生(P<0.05);流式细胞仪分析表明SFRP2 shRNA有缓解HF小鼠肝细胞凋亡的作用。结论我们研究证实SFRP在实验性小鼠肝上皮细胞中可能通过下调内源的某些自分泌信号抑制因子,抑制EMT程序,从而缓解HF。
目的:探討分泌型捲麯相關蛋白(secreted frizzled related protein, SFRP)對實驗性小鼠肝纖維化(Hepatic fibro-sis, HF)的抑製作用。方法建立小鼠CCl4誘導HF模型,隨機分為正常對照組、HF模型組與SFRP2 shRNA處理組。小鼠肝細胞中穫得總 RNA,經RT-PCR轉化 cDNA,構建pcDNA1.0/SFRP2載體 HF 肝細胞併剋隆穫得 pSilencer-U6neo/SFRP2 shRNA穩定轉染肝細胞。採用Westernblot、免疫熒光顯微鏡及激光共聚焦定位分析觀察SFRP2 shRNA抑製HF作用。結果免疫雙熒光顯示SFRP2 shRNA抑製HF小鼠肝細胞FSP-1 mRNA、Smad2 mRNA、Wnt3A mRNA的錶達;經RT-PCR及Western blot分析支持SFRP2 shRNA抑製HF小鼠肝細胞上皮-間質轉換(Epithelial-mesenchymal tran-sitions, EMT)的髮生(P<0.05);流式細胞儀分析錶明SFRP2 shRNA有緩解HF小鼠肝細胞凋亡的作用。結論我們研究證實SFRP在實驗性小鼠肝上皮細胞中可能通過下調內源的某些自分泌信號抑製因子,抑製EMT程序,從而緩解HF。
목적:탐토분비형권곡상관단백(secreted frizzled related protein, SFRP)대실험성소서간섬유화(Hepatic fibro-sis, HF)적억제작용。방법건립소서CCl4유도HF모형,수궤분위정상대조조、HF모형조여SFRP2 shRNA처리조。소서간세포중획득총 RNA,경RT-PCR전화 cDNA,구건pcDNA1.0/SFRP2재체 HF 간세포병극륭획득 pSilencer-U6neo/SFRP2 shRNA은정전염간세포。채용Westernblot、면역형광현미경급격광공취초정위분석관찰SFRP2 shRNA억제HF작용。결과면역쌍형광현시SFRP2 shRNA억제HF소서간세포FSP-1 mRNA、Smad2 mRNA、Wnt3A mRNA적표체;경RT-PCR급Western blot분석지지SFRP2 shRNA억제HF소서간세포상피-간질전환(Epithelial-mesenchymal tran-sitions, EMT)적발생(P<0.05);류식세포의분석표명SFRP2 shRNA유완해HF소서간세포조망적작용。결론아문연구증실SFRP재실험성소서간상피세포중가능통과하조내원적모사자분비신호억제인자,억제EMT정서,종이완해HF。