标记免疫分析与临床
標記免疫分析與臨床
표기면역분석여림상
LABELED IMMUNOASSAYS AND CLINICAL MEDICINE
2014年
4期
462-465
,共4页
郝庆钦%周建平%韩旭%刘培%许秀丽%温新宇%王玲%田亚平
郝慶欽%週建平%韓旭%劉培%許秀麗%溫新宇%王玲%田亞平
학경흠%주건평%한욱%류배%허수려%온신우%왕령%전아평
人肌钙蛋白Ⅰ%单克隆抗体%亲和力%特异性
人肌鈣蛋白Ⅰ%單剋隆抗體%親和力%特異性
인기개단백Ⅰ%단극륭항체%친화력%특이성
Human troponin Ⅰ%Monoclonal antibody%Affinity%Specificity
目的 获取抗人肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)的单克隆抗体(McAb).方法 以人cTnI作为抗原,免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术制备了抗人cTnI高亲和力、高特异性单克隆抗体.随后采用间接ELISA法测定抗血清效价,用protein G亲和纯化法纯化抗体,抗原竞争ELISA法鉴定抗体亲和力,SDS-PAGE法鉴定纯度,Western blotting鉴定抗cTnI单克隆抗体的特异性,竞争ELISA法分析抗原结合位点.结果 筛选出9株稳定分泌抗cTnI的单抗杂交瘤细胞株,其中A3、A9两株免疫球蛋白亚类均为IgG2a,分泌的抗体纯度高,与CK-MB、cTnT无交叉反应,效价均为:1:1024000,亲和力分别为4.21×108mol/L、1.07×108mol/L,抗原结合位点不同.结论 成功制备出了一对高亲和力、高特异性抗人cTnI单克隆抗体.
目的 穫取抗人肌鈣蛋白Ⅰ(cTnI)的單剋隆抗體(McAb).方法 以人cTnI作為抗原,免疫Balb/c小鼠,通過雜交瘤技術製備瞭抗人cTnI高親和力、高特異性單剋隆抗體.隨後採用間接ELISA法測定抗血清效價,用protein G親和純化法純化抗體,抗原競爭ELISA法鑒定抗體親和力,SDS-PAGE法鑒定純度,Western blotting鑒定抗cTnI單剋隆抗體的特異性,競爭ELISA法分析抗原結閤位點.結果 篩選齣9株穩定分泌抗cTnI的單抗雜交瘤細胞株,其中A3、A9兩株免疫毬蛋白亞類均為IgG2a,分泌的抗體純度高,與CK-MB、cTnT無交扠反應,效價均為:1:1024000,親和力分彆為4.21×108mol/L、1.07×108mol/L,抗原結閤位點不同.結論 成功製備齣瞭一對高親和力、高特異性抗人cTnI單剋隆抗體.
목적 획취항인기개단백Ⅰ(cTnI)적단극륭항체(McAb).방법 이인cTnI작위항원,면역Balb/c소서,통과잡교류기술제비료항인cTnI고친화력、고특이성단극륭항체.수후채용간접ELISA법측정항혈청효개,용protein G친화순화법순화항체,항원경쟁ELISA법감정항체친화력,SDS-PAGE법감정순도,Western blotting감정항cTnI단극륭항체적특이성,경쟁ELISA법분석항원결합위점.결과 사선출9주은정분비항cTnI적단항잡교류세포주,기중A3、A9량주면역구단백아류균위IgG2a,분비적항체순도고,여CK-MB、cTnT무교차반응,효개균위:1:1024000,친화력분별위4.21×108mol/L、1.07×108mol/L,항원결합위점불동.결론 성공제비출료일대고친화력、고특이성항인cTnI단극륭항체.
