中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
8期
655-658
,共4页
杨绪秋%方一臻%张艳艳%范红结
楊緒鞦%方一臻%張豔豔%範紅結
양서추%방일진%장염염%범홍결
产肠毒素大肠杆菌%F4菌毛%间接酶联免疫吸附试验
產腸毒素大腸桿菌%F4菌毛%間接酶聯免疫吸附試驗
산장독소대장간균%F4균모%간접매련면역흡부시험
enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC)%F4 pilus%indirect ELISA
为建立检测产肠毒素大肠杆菌(ETEC) F4菌毛抗体的方法,本研究以纯化的重组F4菌毛蛋白作为检测抗原建立了间接ELISA方法,并对该方法的反应条件进行了优化.确定ELISA最佳条件为:包被抗原浓度为3.5 ng/孔;5％脱脂奶封闭液封闭2h;血清最佳稀释度为1∶3 200、血清最佳作用时间为1h;酶标二抗的最佳作用时间为1h.该方法对F5、F6菌毛阳性血清和猪链球菌阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性.其组内和组间的变异系数均小于10％,具有良好的重复性.利用建立的间接ELISA方法检测血清并采用PCR方法检测其肛拭子进行符合性试验,其总符合率为96.2％.临床检测312份未经ETEC免疫的猪血清,阳性率为9.9％.表明该方法可以用于ETEC F4茵毛抗体的临床检测.
為建立檢測產腸毒素大腸桿菌(ETEC) F4菌毛抗體的方法,本研究以純化的重組F4菌毛蛋白作為檢測抗原建立瞭間接ELISA方法,併對該方法的反應條件進行瞭優化.確定ELISA最佳條件為:包被抗原濃度為3.5 ng/孔;5％脫脂奶封閉液封閉2h;血清最佳稀釋度為1∶3 200、血清最佳作用時間為1h;酶標二抗的最佳作用時間為1h.該方法對F5、F6菌毛暘性血清和豬鏈毬菌暘性血清無交扠反應,具有良好的特異性.其組內和組間的變異繫數均小于10％,具有良好的重複性.利用建立的間接ELISA方法檢測血清併採用PCR方法檢測其肛拭子進行符閤性試驗,其總符閤率為96.2％.臨床檢測312份未經ETEC免疫的豬血清,暘性率為9.9％.錶明該方法可以用于ETEC F4茵毛抗體的臨床檢測.
위건립검측산장독소대장간균(ETEC) F4균모항체적방법,본연구이순화적중조F4균모단백작위검측항원건립료간접ELISA방법,병대해방법적반응조건진행료우화.학정ELISA최가조건위:포피항원농도위3.5 ng/공;5％탈지내봉폐액봉폐2h;혈청최가희석도위1∶3 200、혈청최가작용시간위1h;매표이항적최가작용시간위1h.해방법대F5、F6균모양성혈청화저련구균양성혈청무교차반응,구유량호적특이성.기조내화조간적변이계수균소우10％,구유량호적중복성.이용건립적간접ELISA방법검측혈청병채용PCR방법검측기항식자진행부합성시험,기총부합솔위96.2％.림상검측312빈미경ETEC면역적저혈청,양성솔위9.9％.표명해방법가이용우ETEC F4인모항체적림상검측.
