中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
8期
593-596
,共4页
高明%崔红玉%王笑梅%王云峰
高明%崔紅玉%王笑梅%王雲峰
고명%최홍옥%왕소매%왕운봉
嗜酸乳杆菌%S-层蛋白锚定展示%HA1蛋白
嗜痠乳桿菌%S-層蛋白錨定展示%HA1蛋白
기산유간균%S-층단백묘정전시%HA1단백
Lactobacillus acidophilus%S-layer protein surface display system%hemagglutinin protein 1 (HA1)
为研究乳酸茵载体细胞表面锚定结合展示外源蛋白,本研究将禽流感病毒(AIV) H5N1亚型血凝素HA1基因克隆于pET-28a载体中,同时PCR扩增编码S-层蛋白的锚定区域基因Slap-C,并插入HA1基因下游构建重组表达质粒pET-HA1-Slap,转化于E.coli BL21中进行HA1-Slap融合蛋白的表达,SDS-PAGE检测显示表达的HA1-Slap主要以包涵体形式存在.融合蛋白经镍柱纯化、透析复性,与氯化锂处理的嗜酸乳杆菌混合孵育,SDS-PAGE和间接免疫荧光检测表明HA1-Slap锚定结合并展示于嗜酸乳杆菌细胞壁表面,并且具有良好的稳定性.本研究结果证明了嗜酸乳杆菌细胞壁表面展示AIV的HA1抗原蛋白的可行性,为新型乳酸菌载体黏膜免疫疫苗的研究奠定基础.
為研究乳痠茵載體細胞錶麵錨定結閤展示外源蛋白,本研究將禽流感病毒(AIV) H5N1亞型血凝素HA1基因剋隆于pET-28a載體中,同時PCR擴增編碼S-層蛋白的錨定區域基因Slap-C,併插入HA1基因下遊構建重組錶達質粒pET-HA1-Slap,轉化于E.coli BL21中進行HA1-Slap融閤蛋白的錶達,SDS-PAGE檢測顯示錶達的HA1-Slap主要以包涵體形式存在.融閤蛋白經鎳柱純化、透析複性,與氯化鋰處理的嗜痠乳桿菌混閤孵育,SDS-PAGE和間接免疫熒光檢測錶明HA1-Slap錨定結閤併展示于嗜痠乳桿菌細胞壁錶麵,併且具有良好的穩定性.本研究結果證明瞭嗜痠乳桿菌細胞壁錶麵展示AIV的HA1抗原蛋白的可行性,為新型乳痠菌載體黏膜免疫疫苗的研究奠定基礎.
위연구유산인재체세포표면묘정결합전시외원단백,본연구장금류감병독(AIV) H5N1아형혈응소HA1기인극륭우pET-28a재체중,동시PCR확증편마S-층단백적묘정구역기인Slap-C,병삽입HA1기인하유구건중조표체질립pET-HA1-Slap,전화우E.coli BL21중진행HA1-Slap융합단백적표체,SDS-PAGE검측현시표체적HA1-Slap주요이포함체형식존재.융합단백경얼주순화、투석복성,여록화리처리적기산유간균혼합부육,SDS-PAGE화간접면역형광검측표명HA1-Slap묘정결합병전시우기산유간균세포벽표면,병차구유량호적은정성.본연구결과증명료기산유간균세포벽표면전시AIV적HA1항원단백적가행성,위신형유산균재체점막면역역묘적연구전정기출.
