CAJ | 학술논문

目的研究弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAD后内质网(endoplasmic reticulum,ER)钙释放的变化,以及对轴突内早期钙离子浓度的影响,并探讨造成ER钙释放的可能分子机制.方法使用体外培养7～12d的小鼠神经元行轴突牵拉损伤建立体外DAI模型,根据是否行牵拉损伤分为损伤组及对照组.使用ER Tracker Red标记ER,观察ER在轴突损伤前后的分布.通过Fluo-4 AM钙探针及激光共聚焦钙成像技术测量单个轴突内钙离子浓度的变化,并使用20 mmol/L咖啡因作用于细胞,使ER内钙离子快速排空,测量轴突部位咖啡因作用前后的钙离子浓度变化,从而间接观察ER内钙存量的变化.结果 ER Tracker Red荧光结果显示ER存在于神经元轴突部位中,损伤后的轴突肿胀部位存在ER聚集的现象.神经元牵拉损伤后,被牵拉的轴突钙离子浓度明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),受损的轴突表现出肿胀及“串珠样”变性等病理学改变.除损伤后2 min外,使用无钙细胞外液虽然明显降低了牵拉损伤导致的轴突的钙离子浓度升高,但在2～～30 min时间段中钙离子浓度升高依然存在,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组中未经牵拉损伤的神经元轴突可被20 mmol/L咖啡因激起一个明显的轴突钙离子浓度升高,而牵拉损伤后的轴突对咖啡因的这种钙升高反应程度明显下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 DAI后的轴突钙离子浓度升高不仅由细胞外钙内流引起,细胞内钙释放同样参与其中.ER是引起这种DAI后轴突内钙释放的细胞器来源.
목적 연구미만성축색손상(diffuse axonal injury,DAD후내질망(endoplasmic reticulum,ER)개석방적변화,이급대축돌내조기개리자농도적영향,병탐토조성ER개석방적가능분자궤제.방법 사용체외배양7～12d적소서신경원행축돌견랍손상건입체외DAI모형,근거시부행견랍손상분위손상조급대조조.사용ER Tracker Red표기ER,관찰ER재축돌손상전후적분포.통과Fluo-4 AM개탐침급격광공취초개성상기술측량단개축돌내개리자농도적변화,병사용20 mmol/L가배인작용우세포,사ER내개리자쾌속배공,측량축돌부위가배인작용전후적개리자농도변화,종이간접관찰ER내개존량적변화.결과 ER Tracker Red형광결과현시ER존재우신경원축돌부위중,손상후적축돌종창부위존재ER취집적현상.신경원견랍손상후,피견랍적축돌개리자농도명현승고,여대조조비교,차이유통계학의의(P＜0.05),수손적축돌표현출종창급“천주양”변성등병이학개변.제손상후2 min외,사용무개세포외액수연명현강저료견랍손상도치적축돌적개리자농도승고,단재2～～30 min시간단중개리자농도승고의연존재,여대조조비교,차이유통계학의의(P＜0.05).대조조중미경견랍손상적신경원축돌가피20 mmol/L가배인격기일개명현적축돌개리자농도승고,이견랍손상후적축돌대가배인적저충개승고반응정도명현하강,여대조조비교,차이유통계학의의(P＜0.05).결론 DAI후적축돌개리자농도승고불부유세포외개내류인기,세포내개석방동양삼여기중.ER시인기저충DAI후축돌내개석방적세포기래원.