中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2014年
10期
897-901,905
,共6页
黎天尊%晏怡%刘强%夏永智
黎天尊%晏怡%劉彊%夏永智
려천존%안이%류강%하영지
星形胶质细胞%细胞凋亡信号调节蛋白1%细胞增殖%胶质纤维酸性蛋白%波形蛋白
星形膠質細胞%細胞凋亡信號調節蛋白1%細胞增殖%膠質纖維痠性蛋白%波形蛋白
성형효질세포%세포조망신호조절단백1%세포증식%효질섬유산성단백%파형단백
astrocytes%apoptosis signal regulating kinase 1%cell proliferation%GFAP%vimentin
目的 探讨细胞凋亡信号调节蛋白1 (ASK1)在损伤的大鼠脊髓星形胶质细胞增生中的作用.方法 原代培养得到高纯度(＞96％)大鼠脊髓星形胶质细胞,建立星形胶质细胞损伤模型.星形胶质细胞损伤后立即给予生理盐水(损伤模型组)、ASK1特异性抑制剂(Trx组)、ASK1特异性抗体(抗体中和组)处理;对照组为原代大鼠脊髓星形胶质细胞,不作任何处理.应用蛋白质印迹法检测星形胶质细胞标志蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白(Vimentin)的表达情况,应用免疫荧光标记技术检测星形胶质细胞划痕宽度的变化,应用CCK-8法检测星形胶质细胞增殖活性.结果 损伤后24 h及72 h损伤模型组GFAP和Vimentin蛋白的表达均显著高于对照组、Trx组和抗体中和组(P＜0.01);损伤后24 h及72 h损伤模型组星形胶质细胞划痕平均宽度明显小于对照组、Trx组和抗体中和组(P＜0.01);损伤后12h、24 h、72 h对照组、Trx组和抗体中和组星形胶质细胞增殖活性明显低于损伤模型组(P＜0.05).结论 大鼠脊髓星形胶质细胞损伤后阻断ASK1可抑制其细胞增生.
目的 探討細胞凋亡信號調節蛋白1 (ASK1)在損傷的大鼠脊髓星形膠質細胞增生中的作用.方法 原代培養得到高純度(＞96％)大鼠脊髓星形膠質細胞,建立星形膠質細胞損傷模型.星形膠質細胞損傷後立即給予生理鹽水(損傷模型組)、ASK1特異性抑製劑(Trx組)、ASK1特異性抗體(抗體中和組)處理;對照組為原代大鼠脊髓星形膠質細胞,不作任何處理.應用蛋白質印跡法檢測星形膠質細胞標誌蛋白膠質纖維痠性蛋白(GFAP)和波形蛋白(Vimentin)的錶達情況,應用免疫熒光標記技術檢測星形膠質細胞劃痕寬度的變化,應用CCK-8法檢測星形膠質細胞增殖活性.結果 損傷後24 h及72 h損傷模型組GFAP和Vimentin蛋白的錶達均顯著高于對照組、Trx組和抗體中和組(P＜0.01);損傷後24 h及72 h損傷模型組星形膠質細胞劃痕平均寬度明顯小于對照組、Trx組和抗體中和組(P＜0.01);損傷後12h、24 h、72 h對照組、Trx組和抗體中和組星形膠質細胞增殖活性明顯低于損傷模型組(P＜0.05).結論 大鼠脊髓星形膠質細胞損傷後阻斷ASK1可抑製其細胞增生.
목적 탐토세포조망신호조절단백1 (ASK1)재손상적대서척수성형효질세포증생중적작용.방법 원대배양득도고순도(＞96％)대서척수성형효질세포,건립성형효질세포손상모형.성형효질세포손상후립즉급여생리염수(손상모형조)、ASK1특이성억제제(Trx조)、ASK1특이성항체(항체중화조)처리;대조조위원대대서척수성형효질세포,불작임하처리.응용단백질인적법검측성형효질세포표지단백효질섬유산성단백(GFAP)화파형단백(Vimentin)적표체정황,응용면역형광표기기술검측성형효질세포화흔관도적변화,응용CCK-8법검측성형효질세포증식활성.결과 손상후24 h급72 h손상모형조GFAP화Vimentin단백적표체균현저고우대조조、Trx조화항체중화조(P＜0.01);손상후24 h급72 h손상모형조성형효질세포화흔평균관도명현소우대조조、Trx조화항체중화조(P＜0.01);손상후12h、24 h、72 h대조조、Trx조화항체중화조성형효질세포증식활성명현저우손상모형조(P＜0.05).결론 대서척수성형효질세포손상후조단ASK1가억제기세포증생.
