山西农业科学
山西農業科學
산서농업과학
JOURNAL OF SHANXI AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
10期
1047-1050,1059
,共5页
冯光惠%杜虎平%李夏隆%亢福仁
馮光惠%杜虎平%李夏隆%亢福仁
풍광혜%두호평%리하륭%항복인
马铃薯%纺锤块茎类病毒%RT-PCR检测%序列分析
馬鈴藷%紡錘塊莖類病毒%RT-PCR檢測%序列分析
마령서%방추괴경류병독%RT-PCR검측%서렬분석
potato%spindle tuber viroid%RT-PCR detection%sequence analysis
以陕西省榆林地区种植2～3代的马铃薯叶片为材料,首先用Trizol法提取马铃薯叶片总RNA,以已公布的马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)基因序列设计合成一对特异引物,反转录合成cDNA,通过RT-PCR扩增目的DNA片段,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物;然后回收纯化扩增产物并进行克隆和测序,采用DNAstar软件分析序列一致性.电泳结果表明,在榆林地区的马铃薯叶片中均扩增到与预期大小一致的目的片段,说明这些马铃薯均感染了PSTVd;序列分析表明,10个不同采样点PSTVd的目的片段大小为250～251 bp,只是单个碱基之间的转换或缺失,PSTVd在榆林地区几乎没有发生变异,与国内外其他15个地区已报道的序列一致性在82.3％～ 99.5％之间.
以陝西省榆林地區種植2～3代的馬鈴藷葉片為材料,首先用Trizol法提取馬鈴藷葉片總RNA,以已公佈的馬鈴藷紡錘塊莖類病毒(PSTVd)基因序列設計閤成一對特異引物,反轉錄閤成cDNA,通過RT-PCR擴增目的DNA片段,瓊脂糖凝膠電泳檢測擴增產物;然後迴收純化擴增產物併進行剋隆和測序,採用DNAstar軟件分析序列一緻性.電泳結果錶明,在榆林地區的馬鈴藷葉片中均擴增到與預期大小一緻的目的片段,說明這些馬鈴藷均感染瞭PSTVd;序列分析錶明,10箇不同採樣點PSTVd的目的片段大小為250～251 bp,隻是單箇堿基之間的轉換或缺失,PSTVd在榆林地區幾乎沒有髮生變異,與國內外其他15箇地區已報道的序列一緻性在82.3％～ 99.5％之間.
이합서성유임지구충식2～3대적마령서협편위재료,수선용Trizol법제취마령서협편총RNA,이이공포적마령서방추괴경류병독(PSTVd)기인서렬설계합성일대특이인물,반전록합성cDNA,통과RT-PCR확증목적DNA편단,경지당응효전영검측확증산물;연후회수순화확증산물병진행극륭화측서,채용DNAstar연건분석서렬일치성.전영결과표명,재유임지구적마령서협편중균확증도여예기대소일치적목적편단,설명저사마령서균감염료PSTVd;서렬분석표명,10개불동채양점PSTVd적목적편단대소위250～251 bp,지시단개감기지간적전환혹결실,PSTVd재유임지구궤호몰유발생변이,여국내외기타15개지구이보도적서렬일치성재82.3％～ 99.5％지간.
