中国糖尿病杂志
中國糖尿病雜誌
중국당뇨병잡지
CHINESE JOURNAL OF DIABETES
2014年
11期
1024-1029
,共6页
刘艳清%张珍%刘春燕%易秋艳%卢斌%邵加庆
劉豔清%張珍%劉春燕%易鞦豔%盧斌%邵加慶
류염청%장진%류춘연%역추염%로빈%소가경
RNA干扰%肾素-血管紧张素系统%血管紧张素Ⅱ1型受体%胰升血糖素
RNA榦擾%腎素-血管緊張素繫統%血管緊張素Ⅱ1型受體%胰升血糖素
RNA간우%신소-혈관긴장소계통%혈관긴장소Ⅱ1형수체%이승혈당소
RNA interference%Rennin-angiotensin system (RAS)%Angiotensin Ⅱ type 1 receptor (AT1R)%Glucagon
目的 采用RNA干扰技术特异性阻断胰岛局部ATⅡ1型受体(AT1R)表达,观察其对小鼠离体胰岛胰升血糖素分泌功能的影响. 方法 分离培养db/db和db/m小鼠的胰岛细胞,采用RTPCR、Western blot检测AT1R表达.构建小鼠AT1R RNA干扰基因重组腺病毒(Ad-siAT1R),将分离培养的db/db小鼠胰岛细胞分为Ad-siAT1R感染胰岛细胞组(Ad-siAT1R)组、空病毒感染胰岛细胞(Ad-siControl)组和空白对照(Mock)组,培养48 h后检测AT1R表达,利用胰岛灌流系统检测胰岛素和胰升血糖素动态分泌. 结果 db/db小鼠胰岛AT1R mRNA和蛋白的表达水平分别为db/m小鼠胰岛的3.2、3.1倍.腺病毒感染后,Ad-siAT1R组胰岛AT1R mRNA表达水平较Ad-siControl组下降70％～80％,蛋白表达水平下降60％～70％(P＜0.05).胰岛灌流显示,Ad-siAT1R组在高糖刺激1～2 min后胰岛素分泌达峰值140 mU/L,胰升血糖素分泌立即出现下降,达14 pmol/L,较基础值下降13 pmol/L.Ad-siControl组在高糖刺激1～2 min时胰岛素分泌也出现一定程度升高,峰值仅为90 mU/L,为基础值的1.8倍,其胰升血糖素分泌逐渐降至35 pmol/L,仅较基础值下降5 pmol/L,提示Ad-siAT1R组胰岛素第一时相分泌和胰升血糖素过度分泌情况均改善. 结论 RNA干扰特异性阻断胰岛局部RAS可减轻胰升血糖素过度分泌.
目的 採用RNA榦擾技術特異性阻斷胰島跼部ATⅡ1型受體(AT1R)錶達,觀察其對小鼠離體胰島胰升血糖素分泌功能的影響. 方法 分離培養db/db和db/m小鼠的胰島細胞,採用RTPCR、Western blot檢測AT1R錶達.構建小鼠AT1R RNA榦擾基因重組腺病毒(Ad-siAT1R),將分離培養的db/db小鼠胰島細胞分為Ad-siAT1R感染胰島細胞組(Ad-siAT1R)組、空病毒感染胰島細胞(Ad-siControl)組和空白對照(Mock)組,培養48 h後檢測AT1R錶達,利用胰島灌流繫統檢測胰島素和胰升血糖素動態分泌. 結果 db/db小鼠胰島AT1R mRNA和蛋白的錶達水平分彆為db/m小鼠胰島的3.2、3.1倍.腺病毒感染後,Ad-siAT1R組胰島AT1R mRNA錶達水平較Ad-siControl組下降70％～80％,蛋白錶達水平下降60％～70％(P＜0.05).胰島灌流顯示,Ad-siAT1R組在高糖刺激1～2 min後胰島素分泌達峰值140 mU/L,胰升血糖素分泌立即齣現下降,達14 pmol/L,較基礎值下降13 pmol/L.Ad-siControl組在高糖刺激1～2 min時胰島素分泌也齣現一定程度升高,峰值僅為90 mU/L,為基礎值的1.8倍,其胰升血糖素分泌逐漸降至35 pmol/L,僅較基礎值下降5 pmol/L,提示Ad-siAT1R組胰島素第一時相分泌和胰升血糖素過度分泌情況均改善. 結論 RNA榦擾特異性阻斷胰島跼部RAS可減輕胰升血糖素過度分泌.
목적 채용RNA간우기술특이성조단이도국부ATⅡ1형수체(AT1R)표체,관찰기대소서리체이도이승혈당소분비공능적영향. 방법 분리배양db/db화db/m소서적이도세포,채용RTPCR、Western blot검측AT1R표체.구건소서AT1R RNA간우기인중조선병독(Ad-siAT1R),장분리배양적db/db소서이도세포분위Ad-siAT1R감염이도세포조(Ad-siAT1R)조、공병독감염이도세포(Ad-siControl)조화공백대조(Mock)조,배양48 h후검측AT1R표체,이용이도관류계통검측이도소화이승혈당소동태분비. 결과 db/db소서이도AT1R mRNA화단백적표체수평분별위db/m소서이도적3.2、3.1배.선병독감염후,Ad-siAT1R조이도AT1R mRNA표체수평교Ad-siControl조하강70％～80％,단백표체수평하강60％～70％(P＜0.05).이도관류현시,Ad-siAT1R조재고당자격1～2 min후이도소분비체봉치140 mU/L,이승혈당소분비립즉출현하강,체14 pmol/L,교기출치하강13 pmol/L.Ad-siControl조재고당자격1～2 min시이도소분비야출현일정정도승고,봉치부위90 mU/L,위기출치적1.8배,기이승혈당소분비축점강지35 pmol/L,부교기출치하강5 pmol/L,제시Ad-siAT1R조이도소제일시상분비화이승혈당소과도분비정황균개선. 결론 RNA간우특이성조단이도국부RAS가감경이승혈당소과도분비.
