中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2014年
5期
910-919
,共10页
史艳艳%卢洁%王艺磊%王淑红
史豔豔%盧潔%王藝磊%王淑紅
사염염%로길%왕예뢰%왕숙홍
鲤%17α,20β双羟孕酮%基因表达%内参基因%卵母细胞最终成熟%实时荧光定量PCR
鯉%17α,20β雙羥孕酮%基因錶達%內參基因%卵母細胞最終成熟%實時熒光定量PCR
리%17α,20β쌍간잉동%기인표체%내삼기인%란모세포최종성숙%실시형광정량PCR
Cyprinus carpio%17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one%gene expression%reference gene%final oocyte maturation%quantitative real-time PCR
本研究检测了18S rRNA(18S)、28S rRNA(28S)、组织蛋白酶Z(cathepsin Z,CTSZ)、延伸因子1-α(elongationfactor 1-α,EF-1α)、3-磷酸甘油脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,gapdh)、β肌动蛋白(β-actin)6个候选内参基因在17α,2β双羟孕酮(DHP)诱导鲤(Cyprinus carpio)卵母细胞最终成熟过程的表达情况,并应用不同的内参分析软件对数据进行了分析.Bestkeeper软件分析表明EF-1α的变异系数和标准差是6个候选内参基因中最低的,且Bestkeeper指数在6个候选内参基因中最高,说明其表达稳定性最高,适合做为内参基因;geNorm软件分析认为需要同时使用EF-1α和CTSZ两个内参基因来校正目标基因的表达;NormFinder软件分析同样表明EF-1α是6个候选内参基因中表达最稳定的;最后通过RefFinder软件综合比较分析,确定EF-1α相对于其他5个候选内参基因,在17α,20β双羟孕酮诱导卵母细胞最终成熟阶段表达最为稳定,可作为内参校正17α,20β双羟孕酮诱导鲤卵母细胞最终成熟阶段各基因的表达情况.
本研究檢測瞭18S rRNA(18S)、28S rRNA(28S)、組織蛋白酶Z(cathepsin Z,CTSZ)、延伸因子1-α(elongationfactor 1-α,EF-1α)、3-燐痠甘油脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,gapdh)、β肌動蛋白(β-actin)6箇候選內參基因在17α,2β雙羥孕酮(DHP)誘導鯉(Cyprinus carpio)卵母細胞最終成熟過程的錶達情況,併應用不同的內參分析軟件對數據進行瞭分析.Bestkeeper軟件分析錶明EF-1α的變異繫數和標準差是6箇候選內參基因中最低的,且Bestkeeper指數在6箇候選內參基因中最高,說明其錶達穩定性最高,適閤做為內參基因;geNorm軟件分析認為需要同時使用EF-1α和CTSZ兩箇內參基因來校正目標基因的錶達;NormFinder軟件分析同樣錶明EF-1α是6箇候選內參基因中錶達最穩定的;最後通過RefFinder軟件綜閤比較分析,確定EF-1α相對于其他5箇候選內參基因,在17α,20β雙羥孕酮誘導卵母細胞最終成熟階段錶達最為穩定,可作為內參校正17α,20β雙羥孕酮誘導鯉卵母細胞最終成熟階段各基因的錶達情況.
본연구검측료18S rRNA(18S)、28S rRNA(28S)、조직단백매Z(cathepsin Z,CTSZ)、연신인자1-α(elongationfactor 1-α,EF-1α)、3-린산감유탈경매(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,gapdh)、β기동단백(β-actin)6개후선내삼기인재17α,2β쌍간잉동(DHP)유도리(Cyprinus carpio)란모세포최종성숙과정적표체정황,병응용불동적내삼분석연건대수거진행료분석.Bestkeeper연건분석표명EF-1α적변이계수화표준차시6개후선내삼기인중최저적,차Bestkeeper지수재6개후선내삼기인중최고,설명기표체은정성최고,괄합주위내삼기인;geNorm연건분석인위수요동시사용EF-1α화CTSZ량개내삼기인래교정목표기인적표체;NormFinder연건분석동양표명EF-1α시6개후선내삼기인중표체최은정적;최후통과RefFinder연건종합비교분석,학정EF-1α상대우기타5개후선내삼기인,재17α,20β쌍간잉동유도란모세포최종성숙계단표체최위은정,가작위내삼교정17α,20β쌍간잉동유도리란모세포최종성숙계단각기인적표체정황.
