西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2014年
10期
1264-1267
,共4页
陈锡峰%陈飞%肖波%黄安庆
陳錫峰%陳飛%肖波%黃安慶
진석봉%진비%초파%황안경
miR-34%心脏%衰老
miR-34%心髒%衰老
miR-34%심장%쇠로
miR-34%Heart%Aging
目的 探讨miR-34家族中miR-34a、miR-34b、miR-34c在心脏组织的表达情况,确定这个家族中哪一个microRNA是主要表达形式;并比较miR-34家族在年轻小鼠心脏和老年小鼠心脏的表达差异,检测其中哪一个成员对由衰老引起的心脏功能退化具有敏感性,可作为心脏功能的检测标志.方法 提取小鼠心脏总RNA,对miRNA采用加尾法,反转成cDNA.使用RT-PCR的方式检测miR-34a、miR-34b、miR-34c引物的特异性.随后使用实时荧光定量PCR的方法检测miR-34a、miR-34b、miR-34c三个基因在心脏细胞中的表达差异.同时比较年轻小鼠和老年小鼠心脏组织中的miR-34a、miR-34b、miR-34c表达量.结果 提取的总RNA经检测符合要求,反转成cDNA后分别用miR-34a、miR-34b、miR-34c的荧光定量PCR引物检测,确认引物特异性极好,只有单一条带,可以进行下游荧光定量实验.在小鼠心脏组织中miR-34a的表达量较miR-34b和miR-34c高,说明miR-34a在miR-34家族中起主导作用.在老年小鼠心脏中miR-34a的表达量高于年轻小鼠(2.5倍).miR-34b在老年小鼠心脏中也有部分上调(1.4倍),而miR-34c在年轻小鼠和老年小鼠心脏中无明显变化.结论 在miR-34家族中,miR-34a的表达起主导地位,表达量高于miR-34b、miR-34c.随着年龄增加,miR-34a、miR-34b在老年小鼠心脏的表达量比年轻小鼠心脏要高,其中miR-34a 2.5倍的增幅明显大于miR-34b 1.4倍的增幅.故可将miR-34a作为心脏由衰老引起的功能退化的标志基因,也可作诊断心脏功能的重要指标.
目的 探討miR-34傢族中miR-34a、miR-34b、miR-34c在心髒組織的錶達情況,確定這箇傢族中哪一箇microRNA是主要錶達形式;併比較miR-34傢族在年輕小鼠心髒和老年小鼠心髒的錶達差異,檢測其中哪一箇成員對由衰老引起的心髒功能退化具有敏感性,可作為心髒功能的檢測標誌.方法 提取小鼠心髒總RNA,對miRNA採用加尾法,反轉成cDNA.使用RT-PCR的方式檢測miR-34a、miR-34b、miR-34c引物的特異性.隨後使用實時熒光定量PCR的方法檢測miR-34a、miR-34b、miR-34c三箇基因在心髒細胞中的錶達差異.同時比較年輕小鼠和老年小鼠心髒組織中的miR-34a、miR-34b、miR-34c錶達量.結果 提取的總RNA經檢測符閤要求,反轉成cDNA後分彆用miR-34a、miR-34b、miR-34c的熒光定量PCR引物檢測,確認引物特異性極好,隻有單一條帶,可以進行下遊熒光定量實驗.在小鼠心髒組織中miR-34a的錶達量較miR-34b和miR-34c高,說明miR-34a在miR-34傢族中起主導作用.在老年小鼠心髒中miR-34a的錶達量高于年輕小鼠(2.5倍).miR-34b在老年小鼠心髒中也有部分上調(1.4倍),而miR-34c在年輕小鼠和老年小鼠心髒中無明顯變化.結論 在miR-34傢族中,miR-34a的錶達起主導地位,錶達量高于miR-34b、miR-34c.隨著年齡增加,miR-34a、miR-34b在老年小鼠心髒的錶達量比年輕小鼠心髒要高,其中miR-34a 2.5倍的增幅明顯大于miR-34b 1.4倍的增幅.故可將miR-34a作為心髒由衰老引起的功能退化的標誌基因,也可作診斷心髒功能的重要指標.
목적 탐토miR-34가족중miR-34a、miR-34b、miR-34c재심장조직적표체정황,학정저개가족중나일개microRNA시주요표체형식;병비교miR-34가족재년경소서심장화노년소서심장적표체차이,검측기중나일개성원대유쇠로인기적심장공능퇴화구유민감성,가작위심장공능적검측표지.방법 제취소서심장총RNA,대miRNA채용가미법,반전성cDNA.사용RT-PCR적방식검측miR-34a、miR-34b、miR-34c인물적특이성.수후사용실시형광정량PCR적방법검측miR-34a、miR-34b、miR-34c삼개기인재심장세포중적표체차이.동시비교년경소서화노년소서심장조직중적miR-34a、miR-34b、miR-34c표체량.결과 제취적총RNA경검측부합요구,반전성cDNA후분별용miR-34a、miR-34b、miR-34c적형광정량PCR인물검측,학인인물특이성겁호,지유단일조대,가이진행하유형광정량실험.재소서심장조직중miR-34a적표체량교miR-34b화miR-34c고,설명miR-34a재miR-34가족중기주도작용.재노년소서심장중miR-34a적표체량고우년경소서(2.5배).miR-34b재노년소서심장중야유부분상조(1.4배),이miR-34c재년경소서화노년소서심장중무명현변화.결론 재miR-34가족중,miR-34a적표체기주도지위,표체량고우miR-34b、miR-34c.수착년령증가,miR-34a、miR-34b재노년소서심장적표체량비년경소서심장요고,기중miR-34a 2.5배적증폭명현대우miR-34b 1.4배적증폭.고가장miR-34a작위심장유쇠로인기적공능퇴화적표지기인,야가작진단심장공능적중요지표.
