河南大学学报(医学版)
河南大學學報(醫學版)
하남대학학보(의학판)
JOURNAL OF HENAN UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCE)
2014年
3期
179-184
,共6页
猪链球菌2型(S.suis 2)%溶血素SLY%包涵体%溶血活性
豬鏈毬菌2型(S.suis 2)%溶血素SLY%包涵體%溶血活性
저련구균2형(S.suis 2)%용혈소SLY%포함체%용혈활성
目的 克隆并表达猪链球菌2型(S.suis 2)溶血素重组蛋白SLY,对其溶血活性及免疫学特性进行研究,为探讨SLY在S.suis 2感染中的致病机理及筛选有效的疫苗预防和控制猪链球菌病奠定基础.方法 对S.suis 2 05ZYH33全基因序列进行生物信息学分析,构建pET32a sly原核表达质粒并诱导表达出S.suis 2重组溶血素SLY蛋白;采用高浓度尿素裂解包涵体和His-Tag亲和层析对重组SLY蛋白进行纯化并复性;免疫保护实验检验SLY的免疫保护作用.结果 SDS-PAGE显示70 kD的SLY蛋白条带;重组SLY蛋白具有溶血活性并受多种因素的影响;SLY对感染S.suis 2的Balb/c小鼠有一定的免疫保护作用.结论 优化原核表达体系可以有效提高SLY蛋白的表达量,经提纯并复性的重组SLY具有较高的溶血价,为进一步纯化及分析SLY蛋白的特性提供了必要的前提.
目的 剋隆併錶達豬鏈毬菌2型(S.suis 2)溶血素重組蛋白SLY,對其溶血活性及免疫學特性進行研究,為探討SLY在S.suis 2感染中的緻病機理及篩選有效的疫苗預防和控製豬鏈毬菌病奠定基礎.方法 對S.suis 2 05ZYH33全基因序列進行生物信息學分析,構建pET32a sly原覈錶達質粒併誘導錶達齣S.suis 2重組溶血素SLY蛋白;採用高濃度尿素裂解包涵體和His-Tag親和層析對重組SLY蛋白進行純化併複性;免疫保護實驗檢驗SLY的免疫保護作用.結果 SDS-PAGE顯示70 kD的SLY蛋白條帶;重組SLY蛋白具有溶血活性併受多種因素的影響;SLY對感染S.suis 2的Balb/c小鼠有一定的免疫保護作用.結論 優化原覈錶達體繫可以有效提高SLY蛋白的錶達量,經提純併複性的重組SLY具有較高的溶血價,為進一步純化及分析SLY蛋白的特性提供瞭必要的前提.
목적 극륭병표체저련구균2형(S.suis 2)용혈소중조단백SLY,대기용혈활성급면역학특성진행연구,위탐토SLY재S.suis 2감염중적치병궤리급사선유효적역묘예방화공제저련구균병전정기출.방법 대S.suis 2 05ZYH33전기인서렬진행생물신식학분석,구건pET32a sly원핵표체질립병유도표체출S.suis 2중조용혈소SLY단백;채용고농도뇨소렬해포함체화His-Tag친화층석대중조SLY단백진행순화병복성;면역보호실험검험SLY적면역보호작용.결과 SDS-PAGE현시70 kD적SLY단백조대;중조SLY단백구유용혈활성병수다충인소적영향;SLY대감염S.suis 2적Balb/c소서유일정적면역보호작용.결론 우화원핵표체체계가이유효제고SLY단백적표체량,경제순병복성적중조SLY구유교고적용혈개,위진일보순화급분석SLY단백적특성제공료필요적전제.