畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2014年
2期
10-14
,共5页
金云云%剡根强%王静梅%王超丽%马玉英
金雲雲%剡根彊%王靜梅%王超麗%馬玉英
금운운%섬근강%왕정매%왕초려%마옥영
间接ELISA%牛支原体%抗体
間接ELISA%牛支原體%抗體
간접ELISA%우지원체%항체
indirect ELISA%Mycoplasma bovis%antibody
以牛支原体(Mycoplasma bovis)全菌蛋白经超声波裂解后的裂解物作为包被用抗原,建立检测牛支原体血清抗体的间接ELISA方法.通过棋盘滴定法确定抗原最适包被浓度、待检血清最佳稀释度,同时对抗原的包被方式、封闭剂和封闭时间、酶标二抗最佳工作浓度、一抗和二抗最佳作用时间、血清稀释液、底物显色时间进行优化.用该方法测定10份阴性血清的OD450值计算出阴性临界值,并对牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清进行检测.结果:抗原最适包被浓度为200 μg/mL,待检血清最佳稀释度为1∶100,阴性临界值为0.327.用该方法检测牛布氏杆菌病、牛病毒性腹泻黏膜病抗血清均无交叉反应,表明该间接ELISA具有很好的特异性.
以牛支原體(Mycoplasma bovis)全菌蛋白經超聲波裂解後的裂解物作為包被用抗原,建立檢測牛支原體血清抗體的間接ELISA方法.通過棋盤滴定法確定抗原最適包被濃度、待檢血清最佳稀釋度,同時對抗原的包被方式、封閉劑和封閉時間、酶標二抗最佳工作濃度、一抗和二抗最佳作用時間、血清稀釋液、底物顯色時間進行優化.用該方法測定10份陰性血清的OD450值計算齣陰性臨界值,併對牛佈氏桿菌病、牛病毒性腹瀉黏膜病抗血清進行檢測.結果:抗原最適包被濃度為200 μg/mL,待檢血清最佳稀釋度為1∶100,陰性臨界值為0.327.用該方法檢測牛佈氏桿菌病、牛病毒性腹瀉黏膜病抗血清均無交扠反應,錶明該間接ELISA具有很好的特異性.
이우지원체(Mycoplasma bovis)전균단백경초성파렬해후적렬해물작위포피용항원,건립검측우지원체혈청항체적간접ELISA방법.통과기반적정법학정항원최괄포피농도、대검혈청최가희석도,동시대항원적포피방식、봉폐제화봉폐시간、매표이항최가공작농도、일항화이항최가작용시간、혈청희석액、저물현색시간진행우화.용해방법측정10빈음성혈청적OD450치계산출음성림계치,병대우포씨간균병、우병독성복사점막병항혈청진행검측.결과:항원최괄포피농도위200 μg/mL,대검혈청최가희석도위1∶100,음성림계치위0.327.용해방법검측우포씨간균병、우병독성복사점막병항혈청균무교차반응,표명해간접ELISA구유흔호적특이성.
