畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2014年
3期
37-40
,共4页
李盟%张雪寒%何孔旺%黄克和
李盟%張雪寒%何孔旺%黃剋和
리맹%장설한%하공왕%황극화
肠出血性大肠杆菌O157∶H7%紧密素%单克隆抗体
腸齣血性大腸桿菌O157∶H7%緊密素%單剋隆抗體
장출혈성대장간균O157∶H7%긴밀소%단극륭항체
E.coli O157∶H7%intimin%monoclonal antibody
以基因重组技术构建工程菌株表达肠出血性大肠杆菌O157∶H7紧密素的融合蛋白.用纯化的紧密素蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经4次有限稀释法克隆,成功获得2株能稳定传代并分泌抗紧密素单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株.2株单抗分别制备腹水,ELISA检测效价分别为5.2×104,2.5×104.Western blot检测表明,2株单抗与融合蛋白发生特异性反应;ELISA检测表明,2株单抗可特异性检出大肠杆菌O157∶H7.本研究为建立大肠杆菌O157检测方法提供了物质基础.
以基因重組技術構建工程菌株錶達腸齣血性大腸桿菌O157∶H7緊密素的融閤蛋白.用純化的緊密素蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞融閤,對雜交瘤細胞及時篩選,暘性孔經4次有限稀釋法剋隆,成功穫得2株能穩定傳代併分泌抗緊密素單剋隆抗體(McAb)的雜交瘤細胞株.2株單抗分彆製備腹水,ELISA檢測效價分彆為5.2×104,2.5×104.Western blot檢測錶明,2株單抗與融閤蛋白髮生特異性反應;ELISA檢測錶明,2株單抗可特異性檢齣大腸桿菌O157∶H7.本研究為建立大腸桿菌O157檢測方法提供瞭物質基礎.
이기인중조기술구건공정균주표체장출혈성대장간균O157∶H7긴밀소적융합단백.용순화적긴밀소단백면역BALB/c소서,취기비세포여SP2/0골수류세포융합,대잡교류세포급시사선,양성공경4차유한희석법극륭,성공획득2주능은정전대병분비항긴밀소단극륭항체(McAb)적잡교류세포주.2주단항분별제비복수,ELISA검측효개분별위5.2×104,2.5×104.Western blot검측표명,2주단항여융합단백발생특이성반응;ELISA검측표명,2주단항가특이성검출대장간균O157∶H7.본연구위건립대장간균O157검측방법제공료물질기출.
