畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2014年
3期
26-30
,共5页
杜海廷%田玉民%苏玉虹%巴彩凤
杜海廷%田玉民%囌玉虹%巴綵鳳
두해정%전옥민%소옥홍%파채봉
猪%乳糖酶基因%Caco-2%荧光素酶报告基因
豬%乳糖酶基因%Caco-2%熒光素酶報告基因
저%유당매기인%Caco-2%형광소매보고기인
pig%lactase gene%Caco-2%luciferase reporter gene
采用PCR、TA克隆、构建pGL3.0 Basic荧光素酶报告基因载体并转染Caco-2细胞、Dual-Glo萤光素酶检测系统检测细胞系中荧光信号值的方法分析猪乳糖酶基因不同基因型的启动子与增强子活性.结果表明:GA型启动子和CG型启动子相比差异极显著(P=0.001),CG型启动子能显著促进猪LCT基因表达,而GA型启动子不能促进基因表达.A型增强子,可以使GA型启动子活性显著增强(P＜0.05),使CG型启动子活性显著降低(P＜0.01);G型增强子对GA型启动子或CG型启动子,均起显著的抑制作用(P＜0.01).猪LCT增强子和启动子多态性位点组合形成的单倍型促进基因表达的作用从高到低顺序为:A型增强子+GA型启动子＞A/G型增强子+CG型启动子＞G型增强子+GA型启动子.
採用PCR、TA剋隆、構建pGL3.0 Basic熒光素酶報告基因載體併轉染Caco-2細胞、Dual-Glo螢光素酶檢測繫統檢測細胞繫中熒光信號值的方法分析豬乳糖酶基因不同基因型的啟動子與增彊子活性.結果錶明:GA型啟動子和CG型啟動子相比差異極顯著(P=0.001),CG型啟動子能顯著促進豬LCT基因錶達,而GA型啟動子不能促進基因錶達.A型增彊子,可以使GA型啟動子活性顯著增彊(P＜0.05),使CG型啟動子活性顯著降低(P＜0.01);G型增彊子對GA型啟動子或CG型啟動子,均起顯著的抑製作用(P＜0.01).豬LCT增彊子和啟動子多態性位點組閤形成的單倍型促進基因錶達的作用從高到低順序為:A型增彊子+GA型啟動子＞A/G型增彊子+CG型啟動子＞G型增彊子+GA型啟動子.
채용PCR、TA극륭、구건pGL3.0 Basic형광소매보고기인재체병전염Caco-2세포、Dual-Glo형광소매검측계통검측세포계중형광신호치적방법분석저유당매기인불동기인형적계동자여증강자활성.결과표명:GA형계동자화CG형계동자상비차이겁현저(P=0.001),CG형계동자능현저촉진저LCT기인표체,이GA형계동자불능촉진기인표체.A형증강자,가이사GA형계동자활성현저증강(P＜0.05),사CG형계동자활성현저강저(P＜0.01);G형증강자대GA형계동자혹CG형계동자,균기현저적억제작용(P＜0.01).저LCT증강자화계동자다태성위점조합형성적단배형촉진기인표체적작용종고도저순서위:A형증강자+GA형계동자＞A/G형증강자+CG형계동자＞G형증강자+GA형계동자.
