畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2014年
4期
84-86
,共3页
郎斌%朱弘焱%王佳美%田玉民%苏玉虹
郎斌%硃弘焱%王佳美%田玉民%囌玉虹
랑빈%주홍염%왕가미%전옥민%소옥홍
鸡%阿黑皮素原%多肽抗体%特异性
鷄%阿黑皮素原%多肽抗體%特異性
계%아흑피소원%다태항체%특이성
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根据NCBI GenBank中报道的鸡阿黑皮素原(Pro-opiomelanocortin,POMC)一级结构信息,用TMHMM 2.0和DNA Star软件分析POMC蛋白的跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水性以及抗原性等,综合考虑抗体设计的其他因素,设计出1段12个氨基酸的多肽.将合成后的多肽与牛血清白蛋白(albumin from bovine serum,BSA)偶联,用与BSA偶联的POMC多肽免疫新西兰兔,3个月后获取血清,亲和纯化出抗POMC多肽抗体.通过ELISA法检测效价,Western blot和免疫组化法检测抗体特异性.通过该方法得到了高效价与高特异性的鸡POMC多肽抗体,ELISA法测定其效价可达到1∶128 000,而且该抗体可用于免疫组化,说明所制备的鸡POMC抗体具有高特异、高效价等特点,将为鸡POMC基因的功能研究提供有用的研究材料.
根據NCBI GenBank中報道的鷄阿黑皮素原(Pro-opiomelanocortin,POMC)一級結構信息,用TMHMM 2.0和DNA Star軟件分析POMC蛋白的跨膜結構域、二級結構、疏水性、親水性以及抗原性等,綜閤攷慮抗體設計的其他因素,設計齣1段12箇氨基痠的多肽.將閤成後的多肽與牛血清白蛋白(albumin from bovine serum,BSA)偶聯,用與BSA偶聯的POMC多肽免疫新西蘭兔,3箇月後穫取血清,親和純化齣抗POMC多肽抗體.通過ELISA法檢測效價,Western blot和免疫組化法檢測抗體特異性.通過該方法得到瞭高效價與高特異性的鷄POMC多肽抗體,ELISA法測定其效價可達到1∶128 000,而且該抗體可用于免疫組化,說明所製備的鷄POMC抗體具有高特異、高效價等特點,將為鷄POMC基因的功能研究提供有用的研究材料.
근거NCBI GenBank중보도적계아흑피소원(Pro-opiomelanocortin,POMC)일급결구신식,용TMHMM 2.0화DNA Star연건분석POMC단백적과막결구역、이급결구、소수성、친수성이급항원성등,종합고필항체설계적기타인소,설계출1단12개안기산적다태.장합성후적다태여우혈청백단백(albumin from bovine serum,BSA)우련,용여BSA우련적POMC다태면역신서란토,3개월후획취혈청,친화순화출항POMC다태항체.통과ELISA법검측효개,Western blot화면역조화법검측항체특이성.통과해방법득도료고효개여고특이성적계POMC다태항체,ELISA법측정기효개가체도1∶128 000,이차해항체가용우면역조화,설명소제비적계POMC항체구유고특이、고효개등특점,장위계POMC기인적공능연구제공유용적연구재료.