中国生化药物杂志
中國生化藥物雜誌
중국생화약물잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS
2014年
5期
26-29
,共4页
张毅强%师帅帅%郭改娥%苏娇%汪军梅%李惠芳
張毅彊%師帥帥%郭改娥%囌嬌%汪軍梅%李惠芳
장의강%사수수%곽개아%소교%왕군매%리혜방
前列腺源性ETS因子%增殖%凋亡
前列腺源性ETS因子%增殖%凋亡
전렬선원성ETS인자%증식%조망
PDEF%proliferation%apoptosis
目的 探讨前列腺源性ETS因子(prostate-derived Ets factor,PDEF)对HCT116细胞增殖与凋亡的影响.方法 体外培养HCT116细胞,分成空白对照组,空质粒组和重组表达质粒组,空质粒组转染不含PDEF的空载体,重组表达质粒组转染PDEF重组表达质粒.荧光显微镜下观察PDEF重组质粒表达情况;RT-PCR、Western blot检测3组细胞PDEF mRNA和蛋白的表达情况;CCK8法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 荧光显微镜下空质粒组和重组表达质粒组HCT116细胞均可观察到绿色荧光蛋白的表达,表明质粒已成功转染HCT116细胞;RT-PCR结果显示,与空质粒组相比,重组质粒组PDEF基因表达增高263倍;Western blot结果可见重组质粒组有PDEF蛋白的表达,而空质粒组和对照组没有;CCK8法检测发现PDEF基因的表达能够明显抑制HCT116细胞的增殖(P＜0.05);流式细胞仪结果显示重组质粒组细胞凋亡率显著高于对照组和空质粒组(P＜0.05).结论 在HCT116细胞中表达前列腺上皮源性ETS转录因子,可以抑制细胞的增殖和促进细胞凋亡.
目的 探討前列腺源性ETS因子(prostate-derived Ets factor,PDEF)對HCT116細胞增殖與凋亡的影響.方法 體外培養HCT116細胞,分成空白對照組,空質粒組和重組錶達質粒組,空質粒組轉染不含PDEF的空載體,重組錶達質粒組轉染PDEF重組錶達質粒.熒光顯微鏡下觀察PDEF重組質粒錶達情況;RT-PCR、Western blot檢測3組細胞PDEF mRNA和蛋白的錶達情況;CCK8法檢測細胞增殖情況;流式細胞儀檢測細胞凋亡率.結果 熒光顯微鏡下空質粒組和重組錶達質粒組HCT116細胞均可觀察到綠色熒光蛋白的錶達,錶明質粒已成功轉染HCT116細胞;RT-PCR結果顯示,與空質粒組相比,重組質粒組PDEF基因錶達增高263倍;Western blot結果可見重組質粒組有PDEF蛋白的錶達,而空質粒組和對照組沒有;CCK8法檢測髮現PDEF基因的錶達能夠明顯抑製HCT116細胞的增殖(P＜0.05);流式細胞儀結果顯示重組質粒組細胞凋亡率顯著高于對照組和空質粒組(P＜0.05).結論 在HCT116細胞中錶達前列腺上皮源性ETS轉錄因子,可以抑製細胞的增殖和促進細胞凋亡.
목적 탐토전렬선원성ETS인자(prostate-derived Ets factor,PDEF)대HCT116세포증식여조망적영향.방법 체외배양HCT116세포,분성공백대조조,공질립조화중조표체질립조,공질립조전염불함PDEF적공재체,중조표체질립조전염PDEF중조표체질립.형광현미경하관찰PDEF중조질립표체정황;RT-PCR、Western blot검측3조세포PDEF mRNA화단백적표체정황;CCK8법검측세포증식정황;류식세포의검측세포조망솔.결과 형광현미경하공질립조화중조표체질립조HCT116세포균가관찰도록색형광단백적표체,표명질립이성공전염HCT116세포;RT-PCR결과현시,여공질립조상비,중조질립조PDEF기인표체증고263배;Western blot결과가견중조질립조유PDEF단백적표체,이공질립조화대조조몰유;CCK8법검측발현PDEF기인적표체능구명현억제HCT116세포적증식(P＜0.05);류식세포의결과현시중조질립조세포조망솔현저고우대조조화공질립조(P＜0.05).결론 재HCT116세포중표체전렬선상피원성ETS전록인자,가이억제세포적증식화촉진세포조망.
