畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2014年
6期
33-36
,共4页
替代方法%生长抑制与DNA损伤基因153%致癌物
替代方法%生長抑製與DNA損傷基因153%緻癌物
체대방법%생장억제여DNA손상기인153%치암물
alternative methods%GADD153%carcinogens
本试验旨在构建可在一定程度上代替动物试验,用于快速筛查化合物致癌性的重组SMMC-7721细胞株.方法:构建含有生长抑制与DNA损伤基因153 (GADD153)启动子和绿色荧光蛋白报告基因的重组质粒,稳定转染SMMC-7721细胞;以荧光检测CdCl2对转染细胞的DNA损伤效应;同时以RT-PCR检测内源性GADD153 mRNA的表达,验证荧光强度、GADD153 mRNA表达量依CdCl2浓度变化的剂量依赖关系.结果表明:随着CdC12浓度的增加,GADD153-EGFP细胞株的荧光强度、GADD153 mRNA表达量呈剂量依赖性增加.重组GADD153-EGFP细胞株可检测致癌物的DNA损伤效应,说明此方法代替动物实验是可能的.
本試驗旨在構建可在一定程度上代替動物試驗,用于快速篩查化閤物緻癌性的重組SMMC-7721細胞株.方法:構建含有生長抑製與DNA損傷基因153 (GADD153)啟動子和綠色熒光蛋白報告基因的重組質粒,穩定轉染SMMC-7721細胞;以熒光檢測CdCl2對轉染細胞的DNA損傷效應;同時以RT-PCR檢測內源性GADD153 mRNA的錶達,驗證熒光彊度、GADD153 mRNA錶達量依CdCl2濃度變化的劑量依賴關繫.結果錶明:隨著CdC12濃度的增加,GADD153-EGFP細胞株的熒光彊度、GADD153 mRNA錶達量呈劑量依賴性增加.重組GADD153-EGFP細胞株可檢測緻癌物的DNA損傷效應,說明此方法代替動物實驗是可能的.
본시험지재구건가재일정정도상대체동물시험,용우쾌속사사화합물치암성적중조SMMC-7721세포주.방법:구건함유생장억제여DNA손상기인153 (GADD153)계동자화록색형광단백보고기인적중조질립,은정전염SMMC-7721세포;이형광검측CdCl2대전염세포적DNA손상효응;동시이RT-PCR검측내원성GADD153 mRNA적표체,험증형광강도、GADD153 mRNA표체량의CdCl2농도변화적제량의뢰관계.결과표명:수착CdC12농도적증가,GADD153-EGFP세포주적형광강도、GADD153 mRNA표체량정제량의뢰성증가.중조GADD153-EGFP세포주가검측치암물적DNA손상효응,설명차방법대체동물실험시가능적.
