实用妇产科杂志
實用婦產科雜誌
실용부산과잡지
JOURNAL OF PRACTICAL OBSTETRICS AND GYNECOLOGY
2014年
9期
671-674
,共4页
孙晓娈%姚元庆%尹国武%延佳佳%朱晓明
孫曉孌%姚元慶%尹國武%延佳佳%硃曉明
손효련%요원경%윤국무%연가가%주효명
微小RNA%miR-30a-3p%胰岛素样生长因子-1%双荧光素酶报告基因实验
微小RNA%miR-30a-3p%胰島素樣生長因子-1%雙熒光素酶報告基因實驗
미소RNA%miR-30a-3p%이도소양생장인자-1%쌍형광소매보고기인실험
MicroRNA%MiR-30a-3p%Insulin like growth factor-1%Luciferase activity analysis
目的:预测和验证miR-30a-3p的靶基因.方法:利用生物信息学方法预测miR-30a-3p的靶基因;扩增靶基因3'UTR区,与pmirGLO质粒连接构建靶基因融合表达载体后与miR30a-3p mimics共同转染到人正常滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞中,利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-30a-3p与靶基因的靶向关系;在HTR-8/SVneo细胞中转染miR-30a-3p mimics,利用Western Blot实验检测靶蛋白表达水平.结果:生物信息学方法预测结果显示胰岛素样生长因子-1(IGF-1)为miR-30a-3p靶基因之一;双荧光素酶报告基因实验显示,IGF-1基因3'UTR区中含有明确的miR-30a-3p结合位点;Western Blot实验结果显示HTR-8/SVneo细胞转染miR-30a-3p mimics后,IGF-1蛋白表达水平明显下调(P＜0.05).结论:miR-30a-3p与IGF-1有确切的靶向关系,miR-30a-3p能够负性调控IGF-1蛋白水平的表达.
目的:預測和驗證miR-30a-3p的靶基因.方法:利用生物信息學方法預測miR-30a-3p的靶基因;擴增靶基因3'UTR區,與pmirGLO質粒連接構建靶基因融閤錶達載體後與miR30a-3p mimics共同轉染到人正常滋養細胞繫HTR-8/SVneo細胞中,利用雙熒光素酶報告基因實驗驗證miR-30a-3p與靶基因的靶嚮關繫;在HTR-8/SVneo細胞中轉染miR-30a-3p mimics,利用Western Blot實驗檢測靶蛋白錶達水平.結果:生物信息學方法預測結果顯示胰島素樣生長因子-1(IGF-1)為miR-30a-3p靶基因之一;雙熒光素酶報告基因實驗顯示,IGF-1基因3'UTR區中含有明確的miR-30a-3p結閤位點;Western Blot實驗結果顯示HTR-8/SVneo細胞轉染miR-30a-3p mimics後,IGF-1蛋白錶達水平明顯下調(P＜0.05).結論:miR-30a-3p與IGF-1有確切的靶嚮關繫,miR-30a-3p能夠負性調控IGF-1蛋白水平的錶達.
목적:예측화험증miR-30a-3p적파기인.방법:이용생물신식학방법예측miR-30a-3p적파기인;확증파기인3'UTR구,여pmirGLO질립련접구건파기인융합표체재체후여miR30a-3p mimics공동전염도인정상자양세포계HTR-8/SVneo세포중,이용쌍형광소매보고기인실험험증miR-30a-3p여파기인적파향관계;재HTR-8/SVneo세포중전염miR-30a-3p mimics,이용Western Blot실험검측파단백표체수평.결과:생물신식학방법예측결과현시이도소양생장인자-1(IGF-1)위miR-30a-3p파기인지일;쌍형광소매보고기인실험현시,IGF-1기인3'UTR구중함유명학적miR-30a-3p결합위점;Western Blot실험결과현시HTR-8/SVneo세포전염miR-30a-3p mimics후,IGF-1단백표체수평명현하조(P＜0.05).결론:miR-30a-3p여IGF-1유학절적파향관계,miR-30a-3p능구부성조공IGF-1단백수평적표체.
