CAJ | 학술논문

近年来,间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)已成为干细胞领域的研究热点,其不仅支持造血系统,还可在特定的培养条件下向多种组织细胞分化.人胎盘来源的MSC取材容易.该研究比较不同的组织消化酶(Ⅱ型胶原酶与Ⅳ型胶原酶)分离得到的间充质干细胞的特性.通过手术剪剥离胎盘表面羊膜,剪取胎儿侧的绒毛板组织机械破碎后,分别加含胶原酶Ⅱ和Ⅳ的PBS消化液消化,分离为单个核细胞,用含有10％胎牛血清的DMEM培养基在37℃、5％CO2、95％湿度下培养,48小时后全量换液,去除非贴壁细胞,添加新鲜培养基,当细胞融合90％左右时,胰酶消化传代.通过比较胶原酶Ⅱ和Ⅳ消化得到的原代细胞的总数,后续生长的图片记录,以及通过流式细胞测定使用不同消化酶从绒毛膜中分离得到间充质干细胞的表面标记CD90、CD73、CD105的阳性率情况,比较使用不同消化酶消化胎盘组织分离获得间充质干细胞,并将分离得到的胎盘间充质干细胞进行诱导分化成脂和成骨细胞,来鉴定其干细胞的生物学特性.结果发现消化时间相同,酶浓度相同的,以及摇床转速相同的情况下,使用Ⅱ型胶原酶可以得到更多的单个核细胞,细胞的生长情况较Ⅳ型胶原酶好,若从成本上来比较Ⅱ型胶原酶较Ⅳ胶原酶成本低,所以在生产和实验中可以优选Ⅱ型胶原酶.
근년래,간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs)이성위간세포영역적연구열점,기불부지지조혈계통,환가재특정적배양조건하향다충조직세포분화.인태반래원적MSC취재용역.해연구비교불동적조직소화매(Ⅱ형효원매여Ⅳ형효원매)분리득도적간충질간세포적특성.통과수술전박리태반표면양막,전취태인측적융모판조직궤계파쇄후,분별가함효원매Ⅱ화Ⅳ적PBS소화액소화,분리위단개핵세포,용함유10％태우혈청적DMEM배양기재37℃、5％CO2、95％습도하배양,48소시후전량환액,거제비첩벽세포,첨가신선배양기,당세포융합90％좌우시,이매소화전대.통과비교효원매Ⅱ화Ⅳ소화득도적원대세포적총수,후속생장적도편기록,이급통과류식세포측정사용불동소화매종융모막중분리득도간충질간세포적표면표기CD90、CD73、CD105적양성솔정황,비교사용불동소화매소화태반조직분리획득간충질간세포,병장분리득도적태반간충질간세포진행유도분화성지화성골세포,래감정기간세포적생물학특성.결과발현소화시간상동,매농도상동적,이급요상전속상동적정황하,사용Ⅱ형효원매가이득도경다적단개핵세포,세포적생장정황교Ⅳ형효원매호,약종성본상래비교Ⅱ형효원매교Ⅳ효원매성본저,소이재생산화실험중가이우선Ⅱ형효원매.