农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2014年
8期
958-965
,共8页
朱启迪%翁群珠%张改生%张姣%巨岚%于永昂%牛娜%王军卫%马守才
硃啟迪%翁群珠%張改生%張姣%巨嵐%于永昂%牛娜%王軍衛%馬守纔
주계적%옹군주%장개생%장교%거람%우영앙%우나%왕군위%마수재
小麦%粘类细胞质雄性不育%同核异质%线粒体DNA%SCAR标记
小麥%粘類細胞質雄性不育%同覈異質%線粒體DNA%SCAR標記
소맥%점류세포질웅성불육%동핵이질%선립체DNA%SCAR표기
Wheat%Cytoplasmic male sterility of NIAN type%Isonucleur and allocytoplasm%Mitochondrial DNA%SCAR
为了能在分子水平上有效鉴定具有粘果山羊草(Aegilops kotschyi)、偏凸山羊草(A.ventricosa)、普通小麦变种斯卑尔脱(Triticum spelta)细胞质雄性不育系及其保持系90-110和8222,提高其在杂交小麦(Triticum aestivum L.)研究与应用中的定向遗传改良,本研究对其线粒体DNA进行了扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)标记和序列特征性片段扩增区域(sequence characterized amplified region,SCAR)标记.通过AFLP标记方法,应用64对引物组合EcoR Ⅰ-NNN/MseⅠ-NNN对小麦同核异质雄性不育系和保持系进行扩增,共扩增出682条带,其中113条为多态性条带.引物E-AGG/M-CTA组合在粘果山羊草细胞质雄性不育系中扩增出一条大小约300 bp的特异性条带,对该特异条带进行回收、测序,利用Primer Premier 5.0软件重新设计SCAR引物,并对这3种类型同核异质小麦细胞质雄性不育系和保持系进行扩增,其中引物YW1在3种细胞质雄性不育系和保持系中都扩增出条带,而引物YW2仅在粘果山羊草细胞质雄性不育系扩增出一条198 bp的特异性片段,结果表明,己成功地将AFLP标记转化为操作简便、表现稳定的SCAR标记.此片段与小麦线粒体基因组有很高的同源性(同源性为99％),为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶基因(GenBank登录号:EU534409.1)上的序列,该酶是线粒体中氧化磷酸化的入口酶,与小麦细胞质雄性不育密切相关.本研究可以用于粘类小麦细胞质雄性不育系分子标记辅助育种,也为小麦细胞质种性鉴定提供了技术支撑和理论依据.
為瞭能在分子水平上有效鑒定具有粘果山羊草(Aegilops kotschyi)、偏凸山羊草(A.ventricosa)、普通小麥變種斯卑爾脫(Triticum spelta)細胞質雄性不育繫及其保持繫90-110和8222,提高其在雜交小麥(Triticum aestivum L.)研究與應用中的定嚮遺傳改良,本研究對其線粒體DNA進行瞭擴增片段長度多態性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)標記和序列特徵性片段擴增區域(sequence characterized amplified region,SCAR)標記.通過AFLP標記方法,應用64對引物組閤EcoR Ⅰ-NNN/MseⅠ-NNN對小麥同覈異質雄性不育繫和保持繫進行擴增,共擴增齣682條帶,其中113條為多態性條帶.引物E-AGG/M-CTA組閤在粘果山羊草細胞質雄性不育繫中擴增齣一條大小約300 bp的特異性條帶,對該特異條帶進行迴收、測序,利用Primer Premier 5.0軟件重新設計SCAR引物,併對這3種類型同覈異質小麥細胞質雄性不育繫和保持繫進行擴增,其中引物YW1在3種細胞質雄性不育繫和保持繫中都擴增齣條帶,而引物YW2僅在粘果山羊草細胞質雄性不育繫擴增齣一條198 bp的特異性片段,結果錶明,己成功地將AFLP標記轉化為操作簡便、錶現穩定的SCAR標記.此片段與小麥線粒體基因組有很高的同源性(同源性為99％),為煙酰胺腺嘌呤二覈苷痠(NADH)脫氫酶基因(GenBank登錄號:EU534409.1)上的序列,該酶是線粒體中氧化燐痠化的入口酶,與小麥細胞質雄性不育密切相關.本研究可以用于粘類小麥細胞質雄性不育繫分子標記輔助育種,也為小麥細胞質種性鑒定提供瞭技術支撐和理論依據.
위료능재분자수평상유효감정구유점과산양초(Aegilops kotschyi)、편철산양초(A.ventricosa)、보통소맥변충사비이탈(Triticum spelta)세포질웅성불육계급기보지계90-110화8222,제고기재잡교소맥(Triticum aestivum L.)연구여응용중적정향유전개량,본연구대기선립체DNA진행료확증편단장도다태성(amplified fragment length polymorphism,AFLP)표기화서렬특정성편단확증구역(sequence characterized amplified region,SCAR)표기.통과AFLP표기방법,응용64대인물조합EcoR Ⅰ-NNN/MseⅠ-NNN대소맥동핵이질웅성불육계화보지계진행확증,공확증출682조대,기중113조위다태성조대.인물E-AGG/M-CTA조합재점과산양초세포질웅성불육계중확증출일조대소약300 bp적특이성조대,대해특이조대진행회수、측서,이용Primer Premier 5.0연건중신설계SCAR인물,병대저3충류형동핵이질소맥세포질웅성불육계화보지계진행확증,기중인물YW1재3충세포질웅성불육계화보지계중도확증출조대,이인물YW2부재점과산양초세포질웅성불육계확증출일조198 bp적특이성편단,결과표명,기성공지장AFLP표기전화위조작간편、표현은정적SCAR표기.차편단여소맥선립체기인조유흔고적동원성(동원성위99％),위연선알선표령이핵감산(NADH)탈경매기인(GenBank등록호:EU534409.1)상적서렬,해매시선립체중양화린산화적입구매,여소맥세포질웅성불육밀절상관.본연구가이용우점류소맥세포질웅성불육계분자표기보조육충,야위소맥세포질충성감정제공료기술지탱화이론의거.
