双纤维素酶基因在乳酸杆菌中的融合分泌表达
쌍섬유소매기인재유산간균중적융합분비표체
Fusion Design and Secretory Expression in Lactobacillus casei of Two Cellulase Genes
  • 万方数据
    食品科学 식품과학
    FOOD SCIENCE
    2014年 15期 127-131 ,共5页

    丁轲%罗伟光%丁盼盼%李旺%李元晓%余祖华%恒子钤%贾艳艳%程相朝

    정가%라위광%정반반%리왕%리원효%여조화%항자검%가염염%정상조

    纤维素酶%重组乳酸杆菌%融合%分泌 纖維素酶%重組乳痠桿菌%融閤%分泌
    섬유소매%중조유산간균%융합%분비
    cellulase%recombinant Lactobacillus%fusion%secretion
    为提高纤维素的降解效率,将两种不同的纤维素酶基因在乳酸杆菌中融合表达,实现双纤维素酶在乳酸杆菌中的高效表达.根据两纤维素酶的基因序列设计两对引物,并在两基因间引入一段连接肽.通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)分别扩增得到两纤维素酶基因CelL15和CelL73,将其融合后连接到乳酸杆菌分泌性表达载体pMJ67中,构建重组表达质粒pMJ-CelL15-CelL73,电转化入乳酸杆菌Lactobacillus casei,利用红霉素MRS平板筛选阳性克隆,通过PCR验证获得了分泌表达双纤维素酶的重组乳酸杆菌.电泳实验结果表明重组乳酸杆菌成功表达了1个约为83 kD的融合蛋白.平板酶活力检测发现重组乳酸杆菌能明显降解底物中的羧甲基纤维素钠,培养液上清中纤维素酶酶活力可达1.25 U/mL.
    위제고섬유소적강해효솔,장량충불동적섬유소매기인재유산간균중융합표체,실현쌍섬유소매재유산간균중적고효표체.근거량섬유소매적기인서렬설계량대인물,병재량기인간인입일단련접태.통과취합매련식반응(polymerase chain reaction,PCR)분별확증득도량섬유소매기인CelL15화CelL73,장기융합후련접도유산간균분비성표체재체pMJ67중,구건중조표체질립pMJ-CelL15-CelL73,전전화입유산간균Lactobacillus casei,이용홍매소MRS평판사선양성극륭,통과PCR험증획득료분비표체쌍섬유소매적중조유산간균.전영실험결과표명중조유산간균성공표체료1개약위83 kD적융합단백.평판매활력검측발현중조유산간균능명현강해저물중적최갑기섬유소납,배양액상청중섬유소매매활력가체1.25 U/mL.
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