中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2014年
8期
811-817
,共7页
付丽瑶%周伏喜%王学红%卢放根
付麗瑤%週伏喜%王學紅%盧放根
부려요%주복희%왕학홍%로방근
棕榈酸%THP-1巨噬细胞%活性氧%NALP3%炎性小体
棕櫚痠%THP-1巨噬細胞%活性氧%NALP3%炎性小體
종려산%THP-1거서세포%활성양%NALP3%염성소체
palmitic acid%THP-1 macrophages%ROS%NALP3%inflammasome
目的:探讨NALP3炎性小体在非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的炎症发生发展中的可能作用.方法:选择THP-1构建体外巨噬细胞模型,用不同浓度的棕榈酸干预24 h;用不同浓度的N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)预处理细胞后加入高浓度的棕榈酸孵育24 h.分别用活性氧(reactive oxygen species,ROS)指示剂结合流式细胞仪检测THP-1中ROS的变化;ELISA检测细胞上清液中IL-1β的浓度;免疫荧光技术检测NALP3,caspase-1蛋白的表达;荧光定量PCR检测NALP3蛋白复合体各组分(NALP3,ASC,caspase-1)mRNA的表达水平.结果:与空白组相比,各棕榈酸组细胞内ROS增加,NALP3和caspase-1蛋白表达及其分泌IL-1β水平均增加(P＜0.05),并随棕榈酸浓度增加而增强;NAC预处理后,与单纯棕榈酸组相比,各NAC组THP-1产生ROS水平均下降,同时NALP3和caspase-1蛋白表达水平,NALP3复合体各组分mRNA水平及其分泌IL-1β的能力均降低(P＜0.05),此抑制作用随NAC浓度增加而增强.结论:游离脂肪酸可通过产生ROS调节巨噬细胞NALP3炎性小体信号通路的活化引起炎症因子分泌,该通路可能是NASH的发病机制之一.
目的:探討NALP3炎性小體在非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的炎癥髮生髮展中的可能作用.方法:選擇THP-1構建體外巨噬細胞模型,用不同濃度的棕櫚痠榦預24 h;用不同濃度的N-乙酰半胱氨痠(N-acetylcysteine,NAC)預處理細胞後加入高濃度的棕櫚痠孵育24 h.分彆用活性氧(reactive oxygen species,ROS)指示劑結閤流式細胞儀檢測THP-1中ROS的變化;ELISA檢測細胞上清液中IL-1β的濃度;免疫熒光技術檢測NALP3,caspase-1蛋白的錶達;熒光定量PCR檢測NALP3蛋白複閤體各組分(NALP3,ASC,caspase-1)mRNA的錶達水平.結果:與空白組相比,各棕櫚痠組細胞內ROS增加,NALP3和caspase-1蛋白錶達及其分泌IL-1β水平均增加(P＜0.05),併隨棕櫚痠濃度增加而增彊;NAC預處理後,與單純棕櫚痠組相比,各NAC組THP-1產生ROS水平均下降,同時NALP3和caspase-1蛋白錶達水平,NALP3複閤體各組分mRNA水平及其分泌IL-1β的能力均降低(P＜0.05),此抑製作用隨NAC濃度增加而增彊.結論:遊離脂肪痠可通過產生ROS調節巨噬細胞NALP3炎性小體信號通路的活化引起炎癥因子分泌,該通路可能是NASH的髮病機製之一.
목적:탐토NALP3염성소체재비주정성지방성간염(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)적염증발생발전중적가능작용.방법:선택THP-1구건체외거서세포모형,용불동농도적종려산간예24 h;용불동농도적N-을선반광안산(N-acetylcysteine,NAC)예처리세포후가입고농도적종려산부육24 h.분별용활성양(reactive oxygen species,ROS)지시제결합류식세포의검측THP-1중ROS적변화;ELISA검측세포상청액중IL-1β적농도;면역형광기술검측NALP3,caspase-1단백적표체;형광정량PCR검측NALP3단백복합체각조분(NALP3,ASC,caspase-1)mRNA적표체수평.결과:여공백조상비,각종려산조세포내ROS증가,NALP3화caspase-1단백표체급기분비IL-1β수평균증가(P＜0.05),병수종려산농도증가이증강;NAC예처리후,여단순종려산조상비,각NAC조THP-1산생ROS수평균하강,동시NALP3화caspase-1단백표체수평,NALP3복합체각조분mRNA수평급기분비IL-1β적능력균강저(P＜0.05),차억제작용수NAC농도증가이증강.결론:유리지방산가통과산생ROS조절거서세포NALP3염성소체신호통로적활화인기염증인자분비,해통로가능시NASH적발병궤제지일.
