基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
9期
1204-1210
,共7页
邓海燕%曾俊义%魏云峰%王梦洪%郑泽琪%张婉%文通
鄧海燕%曾俊義%魏雲峰%王夢洪%鄭澤琪%張婉%文通
산해연%증준의%위운봉%왕몽홍%정택기%장완%문통
miR-1%骨髓间充质干细胞%心肌样细胞%Notch
miR-1%骨髓間充質榦細胞%心肌樣細胞%Notch
miR-1%골수간충질간세포%심기양세포%Notch
miR-1%MSCs%cardiomyocyte-specific cells%notch
目的 探讨微小RNA-1对大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响及分化过程中Notch信号分子的表达变化.方法 全骨髓贴壁培养法分离培养大鼠MSCs并进行流式细胞学鉴定,miR-1慢病毒载体感染大鼠MSCs(MSCsmiR-1)按培养时间将细胞分成4组:对照组、培养4、6和15 d组;光镜下观察细胞形态变化,qPCR检测miR-1及心肌细胞特异性基因GATA-4、c TnⅠ、α-actin表达,免疫荧光检测cTnⅠ表达,Western blot检测α-actin表达;qPCR检测Notch信号通路相关基因的表达变化.结果 原代大鼠MSCs呈长梭形、漩涡状生长,98％以上细胞表达CD44和CD29,不足1％的细胞表达CD45.MSCsmiR-1中miR-1表达水平持续上升,同时伴随心肌特异性基因GATA-4、cTnⅠ和α-actin的表达逐渐增强,感染4d后可见cTnⅠ在部分MSCsmR-1中表达,同时可检测到α-actin在MSCsmiR1中表达;MSCsmiR-1向心肌样细胞分化过程中,Notch信号分子Jagged1、Notch1、Notch3和Hey2表达水平逐渐下调,于15 d时下调幅度最大.结论 传导miR-1至大鼠MSCs中可促使其向心肌样细胞的分化;且分化过程中伴随着Notch信号分子Jagged1-Notch1/Notch3-Hey2表达水平下调.
目的 探討微小RNA-1對大鼠骨髓間充質榦細胞嚮心肌樣細胞分化的影響及分化過程中Notch信號分子的錶達變化.方法 全骨髓貼壁培養法分離培養大鼠MSCs併進行流式細胞學鑒定,miR-1慢病毒載體感染大鼠MSCs(MSCsmiR-1)按培養時間將細胞分成4組:對照組、培養4、6和15 d組;光鏡下觀察細胞形態變化,qPCR檢測miR-1及心肌細胞特異性基因GATA-4、c TnⅠ、α-actin錶達,免疫熒光檢測cTnⅠ錶達,Western blot檢測α-actin錶達;qPCR檢測Notch信號通路相關基因的錶達變化.結果 原代大鼠MSCs呈長梭形、漩渦狀生長,98％以上細胞錶達CD44和CD29,不足1％的細胞錶達CD45.MSCsmiR-1中miR-1錶達水平持續上升,同時伴隨心肌特異性基因GATA-4、cTnⅠ和α-actin的錶達逐漸增彊,感染4d後可見cTnⅠ在部分MSCsmR-1中錶達,同時可檢測到α-actin在MSCsmiR1中錶達;MSCsmiR-1嚮心肌樣細胞分化過程中,Notch信號分子Jagged1、Notch1、Notch3和Hey2錶達水平逐漸下調,于15 d時下調幅度最大.結論 傳導miR-1至大鼠MSCs中可促使其嚮心肌樣細胞的分化;且分化過程中伴隨著Notch信號分子Jagged1-Notch1/Notch3-Hey2錶達水平下調.
목적 탐토미소RNA-1대대서골수간충질간세포향심기양세포분화적영향급분화과정중Notch신호분자적표체변화.방법 전골수첩벽배양법분리배양대서MSCs병진행류식세포학감정,miR-1만병독재체감염대서MSCs(MSCsmiR-1)안배양시간장세포분성4조:대조조、배양4、6화15 d조;광경하관찰세포형태변화,qPCR검측miR-1급심기세포특이성기인GATA-4、c TnⅠ、α-actin표체,면역형광검측cTnⅠ표체,Western blot검측α-actin표체;qPCR검측Notch신호통로상관기인적표체변화.결과 원대대서MSCs정장사형、선와상생장,98％이상세포표체CD44화CD29,불족1％적세포표체CD45.MSCsmiR-1중miR-1표체수평지속상승,동시반수심기특이성기인GATA-4、cTnⅠ화α-actin적표체축점증강,감염4d후가견cTnⅠ재부분MSCsmR-1중표체,동시가검측도α-actin재MSCsmiR1중표체;MSCsmiR-1향심기양세포분화과정중,Notch신호분자Jagged1、Notch1、Notch3화Hey2표체수평축점하조,우15 d시하조폭도최대.결론 전도miR-1지대서MSCs중가촉사기향심기양세포적분화;차분화과정중반수착Notch신호분자Jagged1-Notch1/Notch3-Hey2표체수평하조.
