基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2014年
9期
1179-1183
,共5页
曲学彬%刘星霞%韩晶晶%姚瑞芹%赵春华
麯學彬%劉星霞%韓晶晶%姚瑞芹%趙春華
곡학빈%류성하%한정정%요서근%조춘화
骨髓间充质干细胞%初始T细胞%辅助T细胞17
骨髓間充質榦細胞%初始T細胞%輔助T細胞17
골수간충질간세포%초시T세포%보조T세포17
bone marrow mesenchymal stem cell%na(i)ve T cell%helper T cell 17
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)对辅助T细胞17 (Th17)体外分化的免疫调控作用.方法 小鼠CD4+初始T(naive T)细胞与小鼠BM-MSCs共培养,诱导分化3d后流式细胞术检测CD4+ IL-17+ Th17的生成比率,ELISA法检测培养上清中IL-17的浓度,qRT-PCR及Western blot检测Th17特异转录因子Rorγt的表达水平.共培养体系中加入IL-10和PGE2中和抗体后检测Th17的分化率.结果 小鼠BM-MSCs分泌高水平细胞因子TGF-β和IL-6.共培养组CD4+IL-17+Th17的生成率(2.5%±1.5%)和IL-17浓度(23±3 ng/L)均显著低于无BM-MSCs对照组(分别为17.8%±4.2%和268 ±27 ng/L,P<0.05),且转录因子Rorγt的表达量也明显降低.共培养组IL-10和PGE2浓度随诱导天数的增加而逐渐上升,显著高于同期对照组(P<0.05).共培养体系中加入IL-10或PGE2中和抗体后,显著提升CD4+ IL-17+ Th17的生成率(从2.0%±0.5%提高到11.8%±2.5%,P<0.05),提高IL-17分泌水平(从24 ±4 ng/L上升到123 ±25 ng/L,P<0.05),增强Rorγt的表达量.联合使用两种中和抗体能进一步提高Th17的分化生成率.结论 虽然BM-MSCs分泌高水平的Th17分化所需的细胞因子TGF-β和IL-6,但BM-MSCs却抑制Th17的体外分化,其抑制机制可能与IL-10和PGE2有关.
目的 探討骨髓間充質榦細胞(BM-MSCs)對輔助T細胞17 (Th17)體外分化的免疫調控作用.方法 小鼠CD4+初始T(naive T)細胞與小鼠BM-MSCs共培養,誘導分化3d後流式細胞術檢測CD4+ IL-17+ Th17的生成比率,ELISA法檢測培養上清中IL-17的濃度,qRT-PCR及Western blot檢測Th17特異轉錄因子Rorγt的錶達水平.共培養體繫中加入IL-10和PGE2中和抗體後檢測Th17的分化率.結果 小鼠BM-MSCs分泌高水平細胞因子TGF-β和IL-6.共培養組CD4+IL-17+Th17的生成率(2.5%±1.5%)和IL-17濃度(23±3 ng/L)均顯著低于無BM-MSCs對照組(分彆為17.8%±4.2%和268 ±27 ng/L,P<0.05),且轉錄因子Rorγt的錶達量也明顯降低.共培養組IL-10和PGE2濃度隨誘導天數的增加而逐漸上升,顯著高于同期對照組(P<0.05).共培養體繫中加入IL-10或PGE2中和抗體後,顯著提升CD4+ IL-17+ Th17的生成率(從2.0%±0.5%提高到11.8%±2.5%,P<0.05),提高IL-17分泌水平(從24 ±4 ng/L上升到123 ±25 ng/L,P<0.05),增彊Rorγt的錶達量.聯閤使用兩種中和抗體能進一步提高Th17的分化生成率.結論 雖然BM-MSCs分泌高水平的Th17分化所需的細胞因子TGF-β和IL-6,但BM-MSCs卻抑製Th17的體外分化,其抑製機製可能與IL-10和PGE2有關.
목적 탐토골수간충질간세포(BM-MSCs)대보조T세포17 (Th17)체외분화적면역조공작용.방법 소서CD4+초시T(naive T)세포여소서BM-MSCs공배양,유도분화3d후류식세포술검측CD4+ IL-17+ Th17적생성비솔,ELISA법검측배양상청중IL-17적농도,qRT-PCR급Western blot검측Th17특이전록인자Rorγt적표체수평.공배양체계중가입IL-10화PGE2중화항체후검측Th17적분화솔.결과 소서BM-MSCs분비고수평세포인자TGF-β화IL-6.공배양조CD4+IL-17+Th17적생성솔(2.5%±1.5%)화IL-17농도(23±3 ng/L)균현저저우무BM-MSCs대조조(분별위17.8%±4.2%화268 ±27 ng/L,P<0.05),차전록인자Rorγt적표체량야명현강저.공배양조IL-10화PGE2농도수유도천수적증가이축점상승,현저고우동기대조조(P<0.05).공배양체계중가입IL-10혹PGE2중화항체후,현저제승CD4+ IL-17+ Th17적생성솔(종2.0%±0.5%제고도11.8%±2.5%,P<0.05),제고IL-17분비수평(종24 ±4 ng/L상승도123 ±25 ng/L,P<0.05),증강Rorγt적표체량.연합사용량충중화항체능진일보제고Th17적분화생성솔.결론 수연BM-MSCs분비고수평적Th17분화소수적세포인자TGF-β화IL-6,단BM-MSCs각억제Th17적체외분화,기억제궤제가능여IL-10화PGE2유관.