中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2014年
4期
1078-1083
,共6页
林珊珊%朱波%郭子宽%黄国志
林珊珊%硃波%郭子寬%黃國誌
림산산%주파%곽자관%황국지
骨髓间充质干细胞%膜微囊%PC12细胞%兴奋性损伤
骨髓間充質榦細胞%膜微囊%PC12細胞%興奮性損傷
골수간충질간세포%막미낭%PC12세포%흥강성손상
bone marrow mesenchymal stem cell%microvesicle%PC12 cell%excitotoxicity
本研究目的在于探讨骨髓间充质干细胞(BMMSC)来源的膜微囊(microvesicle,MV)对神经细胞的保护作用,以了解MSC对神经修复作用的机制.采用密度梯度离心联合贴壁法分离BMMSC,采用低温高速离心法提取BMMSC-MV.采用流式细胞术鉴定BMMSC,并在透射电子显微镜下观察MV形态.建立谷氨酸致PC12细胞损伤模型,实验分为对照组、谷氨酸损伤组以及BMMSC-MV共培养组.用MTT法检测MV对PC12细胞活性的影响;流式细胞术、Hoechst荧光标记法检测细胞凋亡率的变化.结果表明:分离提取的BMMSC高表达CD29和CD44,不表达或低表达CD31,CD34,CD45.在电子显微镜下MV呈典型的圆形囊泡状.与对照组相比,损伤组细胞活性显著下降,凋亡率增加;BMMSC-MV共培养显著提高了谷氨酸损伤的PC12细胞活性、降低了凋亡率.结论:BMMSC来源的MV对谷氨酸兴奋性损伤的细胞具有明显的保护作用,为MV应用于神经兴奋性损伤性疾病提供了初步的实验和理论依据.
本研究目的在于探討骨髓間充質榦細胞(BMMSC)來源的膜微囊(microvesicle,MV)對神經細胞的保護作用,以瞭解MSC對神經脩複作用的機製.採用密度梯度離心聯閤貼壁法分離BMMSC,採用低溫高速離心法提取BMMSC-MV.採用流式細胞術鑒定BMMSC,併在透射電子顯微鏡下觀察MV形態.建立穀氨痠緻PC12細胞損傷模型,實驗分為對照組、穀氨痠損傷組以及BMMSC-MV共培養組.用MTT法檢測MV對PC12細胞活性的影響;流式細胞術、Hoechst熒光標記法檢測細胞凋亡率的變化.結果錶明:分離提取的BMMSC高錶達CD29和CD44,不錶達或低錶達CD31,CD34,CD45.在電子顯微鏡下MV呈典型的圓形囊泡狀.與對照組相比,損傷組細胞活性顯著下降,凋亡率增加;BMMSC-MV共培養顯著提高瞭穀氨痠損傷的PC12細胞活性、降低瞭凋亡率.結論:BMMSC來源的MV對穀氨痠興奮性損傷的細胞具有明顯的保護作用,為MV應用于神經興奮性損傷性疾病提供瞭初步的實驗和理論依據.
본연구목적재우탐토골수간충질간세포(BMMSC)래원적막미낭(microvesicle,MV)대신경세포적보호작용,이료해MSC대신경수복작용적궤제.채용밀도제도리심연합첩벽법분리BMMSC,채용저온고속리심법제취BMMSC-MV.채용류식세포술감정BMMSC,병재투사전자현미경하관찰MV형태.건립곡안산치PC12세포손상모형,실험분위대조조、곡안산손상조이급BMMSC-MV공배양조.용MTT법검측MV대PC12세포활성적영향;류식세포술、Hoechst형광표기법검측세포조망솔적변화.결과표명:분리제취적BMMSC고표체CD29화CD44,불표체혹저표체CD31,CD34,CD45.재전자현미경하MV정전형적원형낭포상.여대조조상비,손상조세포활성현저하강,조망솔증가;BMMSC-MV공배양현저제고료곡안산손상적PC12세포활성、강저료조망솔.결론:BMMSC래원적MV대곡안산흥강성손상적세포구유명현적보호작용,위MV응용우신경흥강성손상성질병제공료초보적실험화이론의거.
