中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2014年
4期
932-937
,共6页
牛文艳%吴顺泉%徐珍珍%林君%战榕
牛文豔%吳順泉%徐珍珍%林君%戰榕
우문염%오순천%서진진%림군%전용
miRNA Sponge%miR-17%miR-20a%基因沉默%抗白血病机制
miRNA Sponge%miR-17%miR-20a%基因沉默%抗白血病機製
miRNA Sponge%miR-17%miR-20a%기인침묵%항백혈병궤제
miRNA Sponge%miR-17%miR-20a%gene silence%anti-leukemia mechanism
本研究旨在检测急性白血病患者中miR-17和miR-20a前体的表达水平,并探讨miRNA Sponge介导的miR-17和miR-20a沉默的抗白血病作用机制.采用荧光实时定量PCR方法检测初治急性白血病患者及8种白血病细胞株中miR-17和miR-20a前体的表达水平,分析其在各型白血病中的表达情况.利用前期构建的针对miR-17和miR-20a基因的miRNA Sponge慢病毒表达载体,感染高表达miR-17和miR-20a的Jurkat细胞株;用CCK-8方法及流式细胞术分别检测miR-17和miR-20a沉默对Jurkat细胞增殖能力及细胞周期的影响.结果表明:初治急性白血病患者中miR-17和miR-20a前体的表达明显高于正常对照(P<0.05);且与急性髓系白血病患者相比,急性淋巴细胞白血病患者中的表达量更高;然而二者表达量与患者外周血高白细胞计数无明显相关性(P>0.05).miR-17和miR-20a沉默能抑制Jurkat细胞的增殖,使细胞周期阻滞于G1—S期,同时促进细胞的凋亡.结论:急性白血病患者中miR-17和miR-20a呈过表达,可能参与白血病的发生、发展;高表达的miR-17和miR-20a可通过在转录后抑制P21和E2F1表达,从而促进细胞增殖及细胞周期G1 —S期转换,抑制细胞凋亡.
本研究旨在檢測急性白血病患者中miR-17和miR-20a前體的錶達水平,併探討miRNA Sponge介導的miR-17和miR-20a沉默的抗白血病作用機製.採用熒光實時定量PCR方法檢測初治急性白血病患者及8種白血病細胞株中miR-17和miR-20a前體的錶達水平,分析其在各型白血病中的錶達情況.利用前期構建的針對miR-17和miR-20a基因的miRNA Sponge慢病毒錶達載體,感染高錶達miR-17和miR-20a的Jurkat細胞株;用CCK-8方法及流式細胞術分彆檢測miR-17和miR-20a沉默對Jurkat細胞增殖能力及細胞週期的影響.結果錶明:初治急性白血病患者中miR-17和miR-20a前體的錶達明顯高于正常對照(P<0.05);且與急性髓繫白血病患者相比,急性淋巴細胞白血病患者中的錶達量更高;然而二者錶達量與患者外週血高白細胞計數無明顯相關性(P>0.05).miR-17和miR-20a沉默能抑製Jurkat細胞的增殖,使細胞週期阻滯于G1—S期,同時促進細胞的凋亡.結論:急性白血病患者中miR-17和miR-20a呈過錶達,可能參與白血病的髮生、髮展;高錶達的miR-17和miR-20a可通過在轉錄後抑製P21和E2F1錶達,從而促進細胞增殖及細胞週期G1 —S期轉換,抑製細胞凋亡.
본연구지재검측급성백혈병환자중miR-17화miR-20a전체적표체수평,병탐토miRNA Sponge개도적miR-17화miR-20a침묵적항백혈병작용궤제.채용형광실시정량PCR방법검측초치급성백혈병환자급8충백혈병세포주중miR-17화miR-20a전체적표체수평,분석기재각형백혈병중적표체정황.이용전기구건적침대miR-17화miR-20a기인적miRNA Sponge만병독표체재체,감염고표체miR-17화miR-20a적Jurkat세포주;용CCK-8방법급류식세포술분별검측miR-17화miR-20a침묵대Jurkat세포증식능력급세포주기적영향.결과표명:초치급성백혈병환자중miR-17화miR-20a전체적표체명현고우정상대조(P<0.05);차여급성수계백혈병환자상비,급성림파세포백혈병환자중적표체량경고;연이이자표체량여환자외주혈고백세포계수무명현상관성(P>0.05).miR-17화miR-20a침묵능억제Jurkat세포적증식,사세포주기조체우G1—S기,동시촉진세포적조망.결론:급성백혈병환자중miR-17화miR-20a정과표체,가능삼여백혈병적발생、발전;고표체적miR-17화miR-20a가통과재전록후억제P21화E2F1표체,종이촉진세포증식급세포주기G1 —S기전환,억제세포조망.