东南大学学报(医学版)
東南大學學報(醫學版)
동남대학학보(의학판)
JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2014年
4期
445-449
,共5页
心肌细胞%Mg2+%TRPM7%血管紧张素Ⅱ
心肌細胞%Mg2+%TRPM7%血管緊張素Ⅱ
심기세포%Mg2+%TRPM7%혈관긴장소Ⅱ
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目的:探讨TRPM7在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对心肌细胞镁离子平衡调节中的作用.方法:采用原代培养的小鼠心肌细胞作为研究对象,实验分对照、AngⅡ、AngⅡ+氯沙坦(Losartan,AngⅡ的Ⅰ型受体阻断剂)及AngⅡ+2-APB(TRPM7通道阻断剂)组.实验试剂直接加入培养液中与细胞共孵育,应用mag-fura-2镁离子荧光探针动态检测心肌细胞内镁离子水平的变化,实时定量PCR(qPCR)和Western Blotting检测TRPM7在原代培养心肌细胞中的表达水平.结果:与对照组相比,AngⅡ组心肌细胞胞内游离镁离子水平在细胞外生理镁离子浓度及高镁离子浓度环境下均有显著下降;应用Losartan或2-APB均可显著降低AngⅡ所致的游离镁离子下降的作用.qPCR和Western Blotting检测结果提示,AngⅡ对原代培养心肌细胞中TRPM7的表达水平无影响.结论:AngⅡ可通过Ⅰ型受体对原代培养心肌细胞的镁离子代谢产生显著影响,其机制可能是AngⅡ增强了心肌细胞TRPM7的功能而不影响其表达水平.
目的:探討TRPM7在血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)對心肌細胞鎂離子平衡調節中的作用.方法:採用原代培養的小鼠心肌細胞作為研究對象,實驗分對照、AngⅡ、AngⅡ+氯沙坦(Losartan,AngⅡ的Ⅰ型受體阻斷劑)及AngⅡ+2-APB(TRPM7通道阻斷劑)組.實驗試劑直接加入培養液中與細胞共孵育,應用mag-fura-2鎂離子熒光探針動態檢測心肌細胞內鎂離子水平的變化,實時定量PCR(qPCR)和Western Blotting檢測TRPM7在原代培養心肌細胞中的錶達水平.結果:與對照組相比,AngⅡ組心肌細胞胞內遊離鎂離子水平在細胞外生理鎂離子濃度及高鎂離子濃度環境下均有顯著下降;應用Losartan或2-APB均可顯著降低AngⅡ所緻的遊離鎂離子下降的作用.qPCR和Western Blotting檢測結果提示,AngⅡ對原代培養心肌細胞中TRPM7的錶達水平無影響.結論:AngⅡ可通過Ⅰ型受體對原代培養心肌細胞的鎂離子代謝產生顯著影響,其機製可能是AngⅡ增彊瞭心肌細胞TRPM7的功能而不影響其錶達水平.
목적:탐토TRPM7재혈관긴장소Ⅱ(AngⅡ)대심기세포미리자평형조절중적작용.방법:채용원대배양적소서심기세포작위연구대상,실험분대조、AngⅡ、AngⅡ+록사탄(Losartan,AngⅡ적Ⅰ형수체조단제)급AngⅡ+2-APB(TRPM7통도조단제)조.실험시제직접가입배양액중여세포공부육,응용mag-fura-2미리자형광탐침동태검측심기세포내미리자수평적변화,실시정량PCR(qPCR)화Western Blotting검측TRPM7재원대배양심기세포중적표체수평.결과:여대조조상비,AngⅡ조심기세포포내유리미리자수평재세포외생리미리자농도급고미리자농도배경하균유현저하강;응용Losartan혹2-APB균가현저강저AngⅡ소치적유리미리자하강적작용.qPCR화Western Blotting검측결과제시,AngⅡ대원대배양심기세포중TRPM7적표체수평무영향.결론:AngⅡ가통과Ⅰ형수체대원대배양심기세포적미리자대사산생현저영향,기궤제가능시AngⅡ증강료심기세포TRPM7적공능이불영향기표체수평.