CAJ | 학술논문

目的:观察外源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)移植对急性肺损伤(ALI)小鼠受损肺组织的保护作用并探讨其机制.方法:选用转基因EGFP-BALB/c小鼠作为细胞移植供体,获得骨髓单核细胞,体外培养扩增获得足够数量的表达绿色荧光蛋白的EPCs(EGFP-EPCs).选用野生型BALB/c小鼠18只,随机分为假手术组、ALI组及EPC治疗组,每组6只.假手术组气管内滴注PBS,其后经尾静脉注射PBS;ALI组气管内滴注脂多糖溶液,其后经尾静脉注射PBS;EPC治疗组气管内滴注LPS,其后经尾静脉注射EGFP-EPCs.各组小鼠术后3d处死,留取肺组织标本.荧光显微镜下观察各组肺组织中EGFP-EPCs表达情况,HE染色评价各组肺组织损伤程度并进行肺损伤指数评分,比较各组肺组织湿干重比,行肺组织CD34免疫组化染色并测定肺微血管密度(MVD).结果:各组小鼠建模过程顺利,无围手术期死亡.EPC治疗组小鼠肺组织冰冻切片中可观察到均匀附着于血管内皮的绿色荧光表达,而假手术组及ALI组则未见明显的绿色荧光.HE切片显示:LPS可致严重的肺组织损伤,而EPC治疗组肺损伤程度较ALI组明显减轻,肺损伤指数明显低于ALI对照组(P＜0.001).肺组织湿干重比ALI组明显高于假手术组(P＜0.001),而EPC治疗组较ALI组明显降低(P＜0.05).免疫组化染色显示:EPC治疗组肺组织切片中CD34的表达明显增加,MVD值均明显高于假手术组及ALI组(P ＜0.001).结论:对ALI小鼠行外源性EPC移植治疗,输入体内的EPC可定向迁移并黏附于受损的肺毛细血管内皮,直接参与肺毛细血管内皮修复及重建,维持肺毛细血管内皮完整性,减少炎症细胞向肺间质、肺泡内的浸润及对肺组织的炎性损伤.同时,外源性EPC治疗提高了EPC向受损肺组织归巢及受损肺组织内的血管新生.
목적:관찰외원성내피조세포(endothelial progenitor cells,EPCs)이식대급성폐손상(ALI)소서수손폐조직적보호작용병탐토기궤제.방법:선용전기인EGFP-BALB/c소서작위세포이식공체,획득골수단핵세포,체외배양확증획득족구수량적표체록색형광단백적EPCs(EGFP-EPCs).선용야생형BALB/c소서18지,수궤분위가수술조、ALI조급EPC치료조,매조6지.가수술조기관내적주PBS,기후경미정맥주사PBS;ALI조기관내적주지다당용액,기후경미정맥주사PBS;EPC치료조기관내적주LPS,기후경미정맥주사EGFP-EPCs.각조소서술후3d처사,류취폐조직표본.형광현미경하관찰각조폐조직중EGFP-EPCs표체정황,HE염색평개각조폐조직손상정도병진행폐손상지수평분,비교각조폐조직습간중비,행폐조직CD34면역조화염색병측정폐미혈관밀도(MVD).결과:각조소서건모과정순리,무위수술기사망.EPC치료조소서폐조직빙동절편중가관찰도균균부착우혈관내피적록색형광표체,이가수술조급ALI조칙미견명현적록색형광.HE절편현시:LPS가치엄중적폐조직손상,이EPC치료조폐손상정도교ALI조명현감경,폐손상지수명현저우ALI대조조(P＜0.001).폐조직습간중비ALI조명현고우가수술조(P＜0.001),이EPC치료조교ALI조명현강저(P＜0.05).면역조화염색현시:EPC치료조폐조직절편중CD34적표체명현증가,MVD치균명현고우가수술조급ALI조(P ＜0.001).결론:대ALI소서행외원성EPC이식치료,수입체내적EPC가정향천이병점부우수손적폐모세혈관내피,직접삼여폐모세혈관내피수복급중건,유지폐모세혈관내피완정성,감소염증세포향폐간질、폐포내적침윤급대폐조직적염성손상.동시,외원성EPC치료제고료EPC향수손폐조직귀소급수손폐조직내적혈관신생.