CAJ | 학술논문

本研究在牛病毒性腹泻病毒5'UTR基因的保守区设计并合成了1对引物,建立了可以定量检测牛病毒性腹泻病毒核酸的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法.该方法建立的标准曲线相关系数R2为0.999,扩增效率为95.9％,熔解曲线为单一峰值,可检测到初始模板中4.1×101copies/μL的牛病毒性腹泻病毒核酸,是常规RT-PCR方法敏感性的100倍.该检测方法与猪瘟病毒、传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒3型病毒等其它牛源病毒均不发生交叉反应;批内与批间重复性试验变异系数均小于2.2％.本试验建立的荧光定量PCR检测方法可用于牛病毒性腹泻病毒的临床诊断.同时,应用本方法对临床病例的各组织器官进行了病毒RNA定量检测结果表明,胸腺等淋巴组织的病毒含量最高,证实病毒主要侵害淋巴器官,此研究可为临床病例的病毒分离提供借鉴.
본연구재우병독성복사병독5'UTR기인적보수구설계병합성료1대인물,건립료가이정량검측우병독성복사병독핵산적SYBR GreenⅠ형광정량PCR방법.해방법건립적표준곡선상관계수R2위0.999,확증효솔위95.9％,용해곡선위단일봉치,가검측도초시모판중4.1×101copies/μL적우병독성복사병독핵산,시상규RT-PCR방법민감성적100배.해검측방법여저온병독、전염성비기관염병독、우호흡도합포체병독、우부류감병독3형병독등기타우원병독균불발생교차반응;비내여비간중복성시험변이계수균소우2.2％.본시험건립적형광정량PCR검측방법가용우우병독성복사병독적림상진단.동시,응용본방법대림상병례적각조직기관진행료병독RNA정량검측결과표명,흉선등림파조직적병독함량최고,증실병독주요침해림파기관,차연구가위림상병례적병독분리제공차감.