食品与生物技术学报
食品與生物技術學報
식품여생물기술학보
JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY
2014年
8期
821-826
,共6页
吴延涛%丁国伟%席宏星%田亚平
吳延濤%丁國偉%席宏星%田亞平
오연도%정국위%석굉성%전아평
铜绿假单胞杆菌%耐热氨肽酶%筛选%基因克隆
銅綠假單胞桿菌%耐熱氨肽酶%篩選%基因剋隆
동록가단포간균%내열안태매%사선%기인극륭
Pseudomonas aeruginosa%thermo-stable aminopeptidase%isolation%gene cloning
从土壤中筛选得到一株氨肽酶产生菌,经生理生化和分子生物学鉴定被命名为铜绿假单胞杆菌N J-814(Pseudomonas aeruginosa N J-814).在已考察知其所产氨肽酶是一种耐热赖氨酸氨肽酶的基础上,运用PCR技术从基因组中克隆获得该氨肽酶基因(kap),构建其表达载体pET-28a-kap,并最终实现在大肠杆菌BL21(DE3)中部分融合表达.kap基因全长1 500 bp,编码499个氨基酸.氨基酸序列同源性分析发现,其与脱叶链霉菌和糖多孢红霉菌的同源性较高.通过生物信息学方法对其理化性质和功能分析以及kap在大肠杆菌中实现异源表达,将为进一步研究该氨肽酶的耐热机制及功能创造基础.
從土壤中篩選得到一株氨肽酶產生菌,經生理生化和分子生物學鑒定被命名為銅綠假單胞桿菌N J-814(Pseudomonas aeruginosa N J-814).在已攷察知其所產氨肽酶是一種耐熱賴氨痠氨肽酶的基礎上,運用PCR技術從基因組中剋隆穫得該氨肽酶基因(kap),構建其錶達載體pET-28a-kap,併最終實現在大腸桿菌BL21(DE3)中部分融閤錶達.kap基因全長1 500 bp,編碼499箇氨基痠.氨基痠序列同源性分析髮現,其與脫葉鏈黴菌和糖多孢紅黴菌的同源性較高.通過生物信息學方法對其理化性質和功能分析以及kap在大腸桿菌中實現異源錶達,將為進一步研究該氨肽酶的耐熱機製及功能創造基礎.
종토양중사선득도일주안태매산생균,경생리생화화분자생물학감정피명명위동록가단포간균N J-814(Pseudomonas aeruginosa N J-814).재이고찰지기소산안태매시일충내열뢰안산안태매적기출상,운용PCR기술종기인조중극륭획득해안태매기인(kap),구건기표체재체pET-28a-kap,병최종실현재대장간균BL21(DE3)중부분융합표체.kap기인전장1 500 bp,편마499개안기산.안기산서렬동원성분석발현,기여탈협련매균화당다포홍매균적동원성교고.통과생물신식학방법대기이화성질화공능분석이급kap재대장간균중실현이원표체,장위진일보연구해안태매적내열궤제급공능창조기출.
