西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2014年
9期
1109-1112
,共4页
胰腺癌%吉西他滨%放疗增敏%DNA损伤修复
胰腺癌%吉西他濱%放療增敏%DNA損傷脩複
이선암%길서타빈%방료증민%DNA손상수복
Pancreatic cancer%Gemcitabine%Radiosensitization%DNA damage repair
目的 研究吉西他滨(GEM)在体外对胰腺癌细胞的放疗增敏作用及机制.方法 体外培养胰腺癌Panc1 细胞株,将其分为空白对照组、单纯照射组、吉西他滨组及吉西他滨联合放疗组(联合放疗组).采用源皮距(SSD)为100 cm,剂量2、4和6Gy的4MV-X线进行细胞照射;运用MTT实验方法选出细胞生长抑制率≤10%的药物浓度(IC10),即GEM的最佳实验浓度;克隆形成实验观察空白对照组、GEM组、单纯放疗组及联合放疗组胰腺癌细胞Panc1体外增殖情况.流式细胞仪分析上述各组细胞的细胞周期和凋亡改变.免疫印迹法分别检测空白对照组、GEM组、单纯放疗组及联合放疗组DNA损伤以及损伤修复指标γ-H2AX、Rad51、Ku80及p-ATM蛋白的表达.结果 GEM在体外具有放射增敏作用.MTT结果显示,GEM在0.04~0.06μmol/L之间为最佳实验浓度.射线照射后,GEM能显著降低胰腺癌细胞的克隆形成能力,即增殖能力.凋亡结果显示,与GEM组及单独放疗组比较,联合放疗组Panc1细胞的凋亡数明显增加,其凋亡率差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期检测结果表明,GEM作用于胰腺癌细胞后,S期细胞水平明显升高.胰腺癌细胞DNA损伤指标γ-H2AX蛋白表达水平在GEM组,单纯放疗组及联合放疗组均增加,联合放疗组较GEM组有进一步升高.与空白对照组、单纯照射组、GEM组比较,联合放疗组胰腺癌细胞中DNA损伤修复指标Rad51、Ku80及p-ATM蛋白的表达均降低.结论 GEM对胰腺癌放射治疗有增敏作用.其机制涉及诱导细胞凋亡,改变Panc1细胞生长周期,并通过抑制射线照射后胰腺癌细胞DNA损伤修复,间接对胰腺癌的放疗起增敏作用.
目的 研究吉西他濱(GEM)在體外對胰腺癌細胞的放療增敏作用及機製.方法 體外培養胰腺癌Panc1 細胞株,將其分為空白對照組、單純照射組、吉西他濱組及吉西他濱聯閤放療組(聯閤放療組).採用源皮距(SSD)為100 cm,劑量2、4和6Gy的4MV-X線進行細胞照射;運用MTT實驗方法選齣細胞生長抑製率≤10%的藥物濃度(IC10),即GEM的最佳實驗濃度;剋隆形成實驗觀察空白對照組、GEM組、單純放療組及聯閤放療組胰腺癌細胞Panc1體外增殖情況.流式細胞儀分析上述各組細胞的細胞週期和凋亡改變.免疫印跡法分彆檢測空白對照組、GEM組、單純放療組及聯閤放療組DNA損傷以及損傷脩複指標γ-H2AX、Rad51、Ku80及p-ATM蛋白的錶達.結果 GEM在體外具有放射增敏作用.MTT結果顯示,GEM在0.04~0.06μmol/L之間為最佳實驗濃度.射線照射後,GEM能顯著降低胰腺癌細胞的剋隆形成能力,即增殖能力.凋亡結果顯示,與GEM組及單獨放療組比較,聯閤放療組Panc1細胞的凋亡數明顯增加,其凋亡率差異有統計學意義(P<0.05);細胞週期檢測結果錶明,GEM作用于胰腺癌細胞後,S期細胞水平明顯升高.胰腺癌細胞DNA損傷指標γ-H2AX蛋白錶達水平在GEM組,單純放療組及聯閤放療組均增加,聯閤放療組較GEM組有進一步升高.與空白對照組、單純照射組、GEM組比較,聯閤放療組胰腺癌細胞中DNA損傷脩複指標Rad51、Ku80及p-ATM蛋白的錶達均降低.結論 GEM對胰腺癌放射治療有增敏作用.其機製涉及誘導細胞凋亡,改變Panc1細胞生長週期,併通過抑製射線照射後胰腺癌細胞DNA損傷脩複,間接對胰腺癌的放療起增敏作用.
목적 연구길서타빈(GEM)재체외대이선암세포적방료증민작용급궤제.방법 체외배양이선암Panc1 세포주,장기분위공백대조조、단순조사조、길서타빈조급길서타빈연합방료조(연합방료조).채용원피거(SSD)위100 cm,제량2、4화6Gy적4MV-X선진행세포조사;운용MTT실험방법선출세포생장억제솔≤10%적약물농도(IC10),즉GEM적최가실험농도;극륭형성실험관찰공백대조조、GEM조、단순방료조급연합방료조이선암세포Panc1체외증식정황.류식세포의분석상술각조세포적세포주기화조망개변.면역인적법분별검측공백대조조、GEM조、단순방료조급연합방료조DNA손상이급손상수복지표γ-H2AX、Rad51、Ku80급p-ATM단백적표체.결과 GEM재체외구유방사증민작용.MTT결과현시,GEM재0.04~0.06μmol/L지간위최가실험농도.사선조사후,GEM능현저강저이선암세포적극륭형성능력,즉증식능력.조망결과현시,여GEM조급단독방료조비교,연합방료조Panc1세포적조망수명현증가,기조망솔차이유통계학의의(P<0.05);세포주기검측결과표명,GEM작용우이선암세포후,S기세포수평명현승고.이선암세포DNA손상지표γ-H2AX단백표체수평재GEM조,단순방료조급연합방료조균증가,연합방료조교GEM조유진일보승고.여공백대조조、단순조사조、GEM조비교,연합방료조이선암세포중DNA손상수복지표Rad51、Ku80급p-ATM단백적표체균강저.결론 GEM대이선암방사치료유증민작용.기궤제섭급유도세포조망,개변Panc1세포생장주기,병통과억제사선조사후이선암세포DNA손상수복,간접대이선암적방료기증민작용.