中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2014年
17期
158-162
,共5页
杨萍%周玉平%谢宪兵%李华%章永南
楊萍%週玉平%謝憲兵%李華%章永南
양평%주옥평%사헌병%리화%장영남
人脐静脉血管内皮细胞%内脏脂肪素%丹参酮ⅡA磺酸钠%丝裂原激活蛋白激酶%炎症因子
人臍靜脈血管內皮細胞%內髒脂肪素%丹參酮ⅡA磺痠鈉%絲裂原激活蛋白激酶%炎癥因子
인제정맥혈관내피세포%내장지방소%단삼동ⅡA광산납%사렬원격활단백격매%염증인자
human umbilical vein endothelial cell%visfatin%sodium tanshinone Ⅱ A sulfonate (STS)%mitogen-activated protein kinases%inflammatory cytokines
目的:研究内脏脂肪素(visfatin)参与血管内皮细胞损伤的机制及丹参酮ⅡA磺酸钠保护作用的机制.方法:培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC,1×105/mL),用visfatin(250 μg·L-1)刺激HUVEC 4 h,以丹参酮ⅡA(30,60,120 mg·L-1))干预24 h,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中高敏C反应蛋白(hs-C RP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、金属基质蛋白-9(MMP-9)水平,用Western blotting方法观察丝裂原激活蛋白激酶(MAPKs)信号转导通路中p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)的活化情况.分别用p38 MAPK,ERK,JNK特异性抑制剂进行预处理细胞,再给予visfatin(250 μg·L-1)刺激4h,检测细胞上清液中hs-CRP,TNF-α,MMP-9水平.结果:与正常组比较,模型组细胞活力显著降低,细胞上清炎症因子hs-CRP,TNF-α,MMP-9显著增高,细胞内p38 MAPK,ERK,JNK磷酸化蛋白表达显著增高.与模型组比较,丹参酮ⅡA呈剂量依赖性地降低visfatin导致的hs-CRP,TNF-α,MMP-9高表达,并能抑制p38MAPK,ERK1/2磷酸化活化,但对JNK无显著抑制作用.用p38 MAPK,JNK,ERK1/2特异性抑制剂预刺激,可阻止visfatin诱导的hs-CRP,TNF-α,MMP-9细胞因子大量表达.结论:visfatin可能通过激活MAPK磷酸化信号通路,诱导炎症细胞因子高表达,促使血管内皮细胞炎症反应,丹参酮ⅡA通过抑制MAPK信号通路p38,JNK的激活,抑制visfatin诱导的炎症因子高表达,从而减少血管内皮细胞损伤.
目的:研究內髒脂肪素(visfatin)參與血管內皮細胞損傷的機製及丹參酮ⅡA磺痠鈉保護作用的機製.方法:培養人臍靜脈血管內皮細胞(HUVEC,1×105/mL),用visfatin(250 μg·L-1)刺激HUVEC 4 h,以丹參酮ⅡA(30,60,120 mg·L-1))榦預24 h,酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測細胞上清液中高敏C反應蛋白(hs-C RP)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、金屬基質蛋白-9(MMP-9)水平,用Western blotting方法觀察絲裂原激活蛋白激酶(MAPKs)信號轉導通路中p38絲裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)、細胞外信號調節激酶(ERK)、c-Jun氨基末耑激酶(JNK)的活化情況.分彆用p38 MAPK,ERK,JNK特異性抑製劑進行預處理細胞,再給予visfatin(250 μg·L-1)刺激4h,檢測細胞上清液中hs-CRP,TNF-α,MMP-9水平.結果:與正常組比較,模型組細胞活力顯著降低,細胞上清炎癥因子hs-CRP,TNF-α,MMP-9顯著增高,細胞內p38 MAPK,ERK,JNK燐痠化蛋白錶達顯著增高.與模型組比較,丹參酮ⅡA呈劑量依賴性地降低visfatin導緻的hs-CRP,TNF-α,MMP-9高錶達,併能抑製p38MAPK,ERK1/2燐痠化活化,但對JNK無顯著抑製作用.用p38 MAPK,JNK,ERK1/2特異性抑製劑預刺激,可阻止visfatin誘導的hs-CRP,TNF-α,MMP-9細胞因子大量錶達.結論:visfatin可能通過激活MAPK燐痠化信號通路,誘導炎癥細胞因子高錶達,促使血管內皮細胞炎癥反應,丹參酮ⅡA通過抑製MAPK信號通路p38,JNK的激活,抑製visfatin誘導的炎癥因子高錶達,從而減少血管內皮細胞損傷.
목적:연구내장지방소(visfatin)삼여혈관내피세포손상적궤제급단삼동ⅡA광산납보호작용적궤제.방법:배양인제정맥혈관내피세포(HUVEC,1×105/mL),용visfatin(250 μg·L-1)자격HUVEC 4 h,이단삼동ⅡA(30,60,120 mg·L-1))간예24 h,매련면역흡부법(ELISA)검측세포상청액중고민C반응단백(hs-C RP)、종류배사인자-α(TNF-α)、금속기질단백-9(MMP-9)수평,용Western blotting방법관찰사렬원격활단백격매(MAPKs)신호전도통로중p38사렬원격활단백격매(p38MAPK)、세포외신호조절격매(ERK)、c-Jun안기말단격매(JNK)적활화정황.분별용p38 MAPK,ERK,JNK특이성억제제진행예처리세포,재급여visfatin(250 μg·L-1)자격4h,검측세포상청액중hs-CRP,TNF-α,MMP-9수평.결과:여정상조비교,모형조세포활력현저강저,세포상청염증인자hs-CRP,TNF-α,MMP-9현저증고,세포내p38 MAPK,ERK,JNK린산화단백표체현저증고.여모형조비교,단삼동ⅡA정제량의뢰성지강저visfatin도치적hs-CRP,TNF-α,MMP-9고표체,병능억제p38MAPK,ERK1/2린산화활화,단대JNK무현저억제작용.용p38 MAPK,JNK,ERK1/2특이성억제제예자격,가조지visfatin유도적hs-CRP,TNF-α,MMP-9세포인자대량표체.결론:visfatin가능통과격활MAPK린산화신호통로,유도염증세포인자고표체,촉사혈관내피세포염증반응,단삼동ⅡA통과억제MAPK신호통로p38,JNK적격활,억제visfatin유도적염증인자고표체,종이감소혈관내피세포손상.
