CAJ | 학술논문

目的：探讨人脂肪干细胞体外培养方法以及对细胞载体复合物诱导成软骨分化的潜能。方法从人脂肪组织分离人脂肪间充质干细胞（ hADSCs），噻唑盐（ MTT）法检测细胞生长情况，流式细胞术hADSCs细胞表面分子标志，hADSCs成脂、成骨和成软骨的诱导及鉴定检测。 hAD-SCs与不同浓度胶原纤维蛋白溶液混合制成细胞载体复合物凝胶，14 d后进行细胞鉴定。结果体外分离、培养出高活性hADSCs，增值曲线呈S形。细胞CD29、CD90、CD105呈阳性表达，CD34、CD45呈阴性表达。 hADSCs成脂诱导后细胞呈类圆形，在细胞浆内有透亮的脂滴出现，油红 O染色脂滴呈鲜红色。成骨诱导后细胞呈为不规则形，免疫荧光检测细胞表达骨唾液酸蛋白、骨桥蛋白、骨连接蛋白。 hADSCs成软骨诱导后细胞形态变为铺路石样，甲苯胺蓝染色细胞基质呈蓝色，免疫组化检测Ⅱ型胶原蛋白染色呈阳性。阿利新蓝染色细胞载体复合物成蓝色，免疫组化检测Ⅱ型胶原蛋白结果显示，混合胶原蛋白组较单一胶原蛋白组更强阳性表达。结论本研究成功分离培养出高度同源性 hADSCs，具有多分化潜能。复合胶原纤维蛋白载体诱导hADSCs成软骨细胞分化，可能作为修复关节软骨缺损的理想载体支架材料。
목적：탐토인지방간세포체외배양방법이급대세포재체복합물유도성연골분화적잠능。방법종인지방조직분리인지방간충질간세포（ hADSCs），새서염（ MTT）법검측세포생장정황，류식세포술hADSCs세포표면분자표지，hADSCs성지、성골화성연골적유도급감정검측。 hAD-SCs여불동농도효원섬유단백용액혼합제성세포재체복합물응효，14 d후진행세포감정。결과체외분리、배양출고활성hADSCs，증치곡선정S형。세포CD29、CD90、CD105정양성표체，CD34、CD45정음성표체。 hADSCs성지유도후세포정류원형，재세포장내유투량적지적출현，유홍 O염색지적정선홍색。성골유도후세포정위불규칙형，면역형광검측세포표체골타액산단백、골교단백、골련접단백。 hADSCs성연골유도후세포형태변위포로석양，갑분알람염색세포기질정람색，면역조화검측Ⅱ형효원단백염색정양성。아리신람염색세포재체복합물성람색，면역조화검측Ⅱ형효원단백결과현시，혼합효원단백조교단일효원단백조경강양성표체。결론본연구성공분리배양출고도동원성 hADSCs，구유다분화잠능。복합효원섬유단백재체유도hADSCs성연골세포분화，가능작위수복관절연골결손적이상재체지가재료。