医用生物力学
醫用生物力學
의용생물역학
JOURNAL OF MEDICAL BIOMECHANICS
2011年
3期
232-239
,共8页
沈宝荣%姜隽%齐颖新%姜宗来
瀋寶榮%薑雋%齊穎新%薑宗來
침보영%강준%제영신%강종래
切应力%细胞培养%内皮细胞%血管平滑肌细胞%血小板源性生长因子%通透
切應力%細胞培養%內皮細胞%血管平滑肌細胞%血小闆源性生長因子%通透
절응력%세포배양%내피세포%혈관평활기세포%혈소판원성생장인자%통투
目的 探讨细胞联合培养杯膜的孔径对生物大分子通透的影响,解决血管细胞分子力学生物学实验的关键技术问题.方法 以杯底PET膜孔径为0.4 μm和1.0 μm的两种型号细胞联合培养杯作为研究对象,将大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)和内皮细胞(endothelial cells,ECs)分别种植于联合培养杯底PET膜的内外侧面.实验分为EC/VSMC联合培养施加低切应力组、PET膜未接种细胞静止组、PET膜单侧接种细胞静止组和PET膜双侧接种细胞静止组.ELISA检测低切应力组ECs侧和VSMCs侧培养液中血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor BB,PDGF-BB)含量,Western blotting检测重组PDGF-BB(rPDGF-BB)刺激后,各组细胞内信号转导分子p-ERK1/2和p-Akt以及核骨架蛋白Lamin A的表达变化.结果 EC/VSMC联合培养施加0.5 Pa层流低切应力12 h后,0.4 μm联合培养杯VSMCs侧PDGF-BB浓度显著高于ECs侧.0.4 μm和1.0 μm两种孔径的PET膜未接种细胞时,rPDGF-BB上调了隔开培养细胞的p-ERK1/2和p-Akt表达,并下调Lamin A表达.PET膜外侧面接种单层细胞时,rPDGF-BB上调了对侧细胞的p-ERK1/2和p-Akt表达,并下调Lamin A表达.PET膜内外侧面均接种细胞时,rPDGF-BB仅能影响0.4μm PET膜同侧细胞的p-ERK1/2、p-Akt和Lamin A表达,对对侧细胞无明显作用;而1.0 μm PET膜两侧细胞的p-ERK1/2、p-Akt和Lamin A表达无显著性差异.结论 两种有孔PET材料本身均允许生物大分子的通透,而细胞接种会影响有孔PET膜对生物大分子的通透.0.4 μm孔径PET膜两侧均接种细胞时,对生物大分子的通透明显减弱,更接近于在体情况.
目的 探討細胞聯閤培養杯膜的孔徑對生物大分子通透的影響,解決血管細胞分子力學生物學實驗的關鍵技術問題.方法 以杯底PET膜孔徑為0.4 μm和1.0 μm的兩種型號細胞聯閤培養杯作為研究對象,將大鼠血管平滑肌細胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)和內皮細胞(endothelial cells,ECs)分彆種植于聯閤培養杯底PET膜的內外側麵.實驗分為EC/VSMC聯閤培養施加低切應力組、PET膜未接種細胞靜止組、PET膜單側接種細胞靜止組和PET膜雙側接種細胞靜止組.ELISA檢測低切應力組ECs側和VSMCs側培養液中血小闆源性生長因子(platelet-derived growth factor BB,PDGF-BB)含量,Western blotting檢測重組PDGF-BB(rPDGF-BB)刺激後,各組細胞內信號轉導分子p-ERK1/2和p-Akt以及覈骨架蛋白Lamin A的錶達變化.結果 EC/VSMC聯閤培養施加0.5 Pa層流低切應力12 h後,0.4 μm聯閤培養杯VSMCs側PDGF-BB濃度顯著高于ECs側.0.4 μm和1.0 μm兩種孔徑的PET膜未接種細胞時,rPDGF-BB上調瞭隔開培養細胞的p-ERK1/2和p-Akt錶達,併下調Lamin A錶達.PET膜外側麵接種單層細胞時,rPDGF-BB上調瞭對側細胞的p-ERK1/2和p-Akt錶達,併下調Lamin A錶達.PET膜內外側麵均接種細胞時,rPDGF-BB僅能影響0.4μm PET膜同側細胞的p-ERK1/2、p-Akt和Lamin A錶達,對對側細胞無明顯作用;而1.0 μm PET膜兩側細胞的p-ERK1/2、p-Akt和Lamin A錶達無顯著性差異.結論 兩種有孔PET材料本身均允許生物大分子的通透,而細胞接種會影響有孔PET膜對生物大分子的通透.0.4 μm孔徑PET膜兩側均接種細胞時,對生物大分子的通透明顯減弱,更接近于在體情況.
목적 탐토세포연합배양배막적공경대생물대분자통투적영향,해결혈관세포분자역학생물학실험적관건기술문제.방법 이배저PET막공경위0.4 μm화1.0 μm적량충형호세포연합배양배작위연구대상,장대서혈관평활기세포(vascular smooth muscle cells,VSMCs)화내피세포(endothelial cells,ECs)분별충식우연합배양배저PET막적내외측면.실험분위EC/VSMC연합배양시가저절응력조、PET막미접충세포정지조、PET막단측접충세포정지조화PET막쌍측접충세포정지조.ELISA검측저절응력조ECs측화VSMCs측배양액중혈소판원성생장인자(platelet-derived growth factor BB,PDGF-BB)함량,Western blotting검측중조PDGF-BB(rPDGF-BB)자격후,각조세포내신호전도분자p-ERK1/2화p-Akt이급핵골가단백Lamin A적표체변화.결과 EC/VSMC연합배양시가0.5 Pa층류저절응력12 h후,0.4 μm연합배양배VSMCs측PDGF-BB농도현저고우ECs측.0.4 μm화1.0 μm량충공경적PET막미접충세포시,rPDGF-BB상조료격개배양세포적p-ERK1/2화p-Akt표체,병하조Lamin A표체.PET막외측면접충단층세포시,rPDGF-BB상조료대측세포적p-ERK1/2화p-Akt표체,병하조Lamin A표체.PET막내외측면균접충세포시,rPDGF-BB부능영향0.4μm PET막동측세포적p-ERK1/2、p-Akt화Lamin A표체,대대측세포무명현작용;이1.0 μm PET막량측세포적p-ERK1/2、p-Akt화Lamin A표체무현저성차이.결론 량충유공PET재료본신균윤허생물대분자적통투,이세포접충회영향유공PET막대생물대분자적통투.0.4 μm공경PET막량측균접충세포시,대생물대분자적통투명현감약,경접근우재체정황.
