医用生物力学
醫用生物力學
의용생물역학
JOURNAL OF MEDICAL BIOMECHANICS
2012年
5期
548-555
,共8页
崔晓栋%官秀梅%张晓芸%李宏%李鑫%王建英%成敏
崔曉棟%官秀梅%張曉蕓%李宏%李鑫%王建英%成敏
최효동%관수매%장효예%리굉%리흠%왕건영%성민
层流剪切应力%内皮祖细胞%细胞骨架%细胞培养%细胞分化
層流剪切應力%內皮祖細胞%細胞骨架%細胞培養%細胞分化
층류전절응력%내피조세포%세포골가%세포배양%세포분화
目的 探讨细胞骨架F-actin在层流剪切应力促内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)向内皮分化中的作用.方法 对大鼠骨髓来源的EPCs施以层流剪切应力(1.2 Pa),以荧光定量RT-PCR及流式细胞术检测特异性内皮细胞标记分子vWF、CD31 mRNA及蛋白的表达来反映EPCs分化程度;以免疫荧光染色观测F-actin的排列情况;应用Ras GTPase Pull-Down方法检测Ras活性.结果 层流剪切力处理后,EPCs分化标记vWF及CD31的基因及蛋白表达较静止组明显升高(P＜0.05),细胞骨架F-actin发生重排,Ras活性明显增高.细胞骨架稳定剂Jasplakinolide (JAS)及细胞骨架松弛剂Cytochalasin D (CytoD)预处理均不同程度地抑制了层流剪切应力所致的细胞骨架的重排、Ras活性的上调及EPCs分化效应(P＜0.05),而过表达Ras则对层流剪切应力诱导的EPCs分化有明显促进作用(P＜0.05).结论 一定大小的层流剪切应力可促进EPCs向内皮细胞分化,其机制可能与层流剪切应力重塑细胞骨架F-actin,进而影响Ras活性有关;这对于揭示受损血管内皮修复的具体机制、阐明动脉粥样硬化等心血管疾病的发病机理及临床防治此类疾病具有一定的意义.
目的 探討細胞骨架F-actin在層流剪切應力促內皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)嚮內皮分化中的作用.方法 對大鼠骨髓來源的EPCs施以層流剪切應力(1.2 Pa),以熒光定量RT-PCR及流式細胞術檢測特異性內皮細胞標記分子vWF、CD31 mRNA及蛋白的錶達來反映EPCs分化程度;以免疫熒光染色觀測F-actin的排列情況;應用Ras GTPase Pull-Down方法檢測Ras活性.結果 層流剪切力處理後,EPCs分化標記vWF及CD31的基因及蛋白錶達較靜止組明顯升高(P＜0.05),細胞骨架F-actin髮生重排,Ras活性明顯增高.細胞骨架穩定劑Jasplakinolide (JAS)及細胞骨架鬆弛劑Cytochalasin D (CytoD)預處理均不同程度地抑製瞭層流剪切應力所緻的細胞骨架的重排、Ras活性的上調及EPCs分化效應(P＜0.05),而過錶達Ras則對層流剪切應力誘導的EPCs分化有明顯促進作用(P＜0.05).結論 一定大小的層流剪切應力可促進EPCs嚮內皮細胞分化,其機製可能與層流剪切應力重塑細胞骨架F-actin,進而影響Ras活性有關;這對于揭示受損血管內皮脩複的具體機製、闡明動脈粥樣硬化等心血管疾病的髮病機理及臨床防治此類疾病具有一定的意義.
목적 탐토세포골가F-actin재층류전절응력촉내피조세포(endothelial progenitor cells,EPCs)향내피분화중적작용.방법 대대서골수래원적EPCs시이층류전절응력(1.2 Pa),이형광정량RT-PCR급류식세포술검측특이성내피세포표기분자vWF、CD31 mRNA급단백적표체래반영EPCs분화정도;이면역형광염색관측F-actin적배렬정황;응용Ras GTPase Pull-Down방법검측Ras활성.결과 층류전절력처리후,EPCs분화표기vWF급CD31적기인급단백표체교정지조명현승고(P＜0.05),세포골가F-actin발생중배,Ras활성명현증고.세포골가은정제Jasplakinolide (JAS)급세포골가송이제Cytochalasin D (CytoD)예처리균불동정도지억제료층류전절응력소치적세포골가적중배、Ras활성적상조급EPCs분화효응(P＜0.05),이과표체Ras칙대층류전절응력유도적EPCs분화유명현촉진작용(P＜0.05).결론 일정대소적층류전절응력가촉진EPCs향내피세포분화,기궤제가능여층류전절응력중소세포골가F-actin,진이영향Ras활성유관;저대우게시수손혈관내피수복적구체궤제、천명동맥죽양경화등심혈관질병적발병궤리급림상방치차류질병구유일정적의의.
