医用生物力学
醫用生物力學
의용생물역학
JOURNAL OF MEDICAL BIOMECHANICS
2013年
4期
448-453
,共6页
许海委%徐宝山%杨强%李秀兰%马信龙%夏群%张春秋%伍耀宏%曾超
許海委%徐寶山%楊彊%李秀蘭%馬信龍%夏群%張春鞦%伍耀宏%曾超
허해위%서보산%양강%리수란%마신룡%하군%장춘추%오요굉%증초
脱细胞%纤维环%力学特性%组织工程%生物力学
脫細胞%纖維環%力學特性%組織工程%生物力學
탈세포%섬유배%역학특성%조직공정%생물역학
Decellularization%Annulus fibrosus%Mechanical properties%Tissue engineering%Biomechanics
目的 探讨不同脱细胞处理方法对猪尾椎间盘纤维环生物力学特性及组织结构的影响,为构建组织工程纤维环提供实验依据.方法 取新鲜猪尾纤维环60个,随机分为4组,每组15个.Triton X-100组(A组):先将纤维环放入Tris-HC1低渗缓冲液中振荡48 h,再用TritonX-100、DNase I和RNase A对纤维环脱细胞处理；SDS组(B组):将纤维环冻融3次,接着用SDS、DNase I和RNase A对纤维环脱细胞处理；胰蛋白酶组(C组):用含胰蛋白酶、DNase I和RNase A的Tris缓冲液对纤维环脱细胞处理；对照组(D组):纤维环不做任何处理.采用HE染色与扫描电镜方法,观察各组脱细胞情况以及纤维环超微结构的变化；采用生物化学和生物力学方法检测各组纤维环的胶原含量、氨基葡聚糖(GAG)含量及力学参数.结果 与对照组比较,HE染色及扫描电镜可见A、B、C3组均无细胞残留；A组纤维环超微结构未见破坏,C组纤维环超微结构可见轻度破坏,B组纤维环超微结构可见明显破坏.A、B、C3组纤维环胶原含量与对照组比较无统计学差异(P＞0.05),但GAG含量均明显低于对照组(P＜0.05).A、C两组的力学参数(极限载荷、极限应力、韧度、弹性模量、断裂功耗)与对照组无统计学差异(P＞0.05),B组上述力学参数均低于对照组(P＜0.05).结论 Triton X-100组处理后的猪尾椎间盘纤维环无细胞残留,结构无破坏,基质成分及力学性能保存良好,适合于构建组织工程纤维环.
目的 探討不同脫細胞處理方法對豬尾椎間盤纖維環生物力學特性及組織結構的影響,為構建組織工程纖維環提供實驗依據.方法 取新鮮豬尾纖維環60箇,隨機分為4組,每組15箇.Triton X-100組(A組):先將纖維環放入Tris-HC1低滲緩遲液中振盪48 h,再用TritonX-100、DNase I和RNase A對纖維環脫細胞處理；SDS組(B組):將纖維環凍融3次,接著用SDS、DNase I和RNase A對纖維環脫細胞處理；胰蛋白酶組(C組):用含胰蛋白酶、DNase I和RNase A的Tris緩遲液對纖維環脫細胞處理；對照組(D組):纖維環不做任何處理.採用HE染色與掃描電鏡方法,觀察各組脫細胞情況以及纖維環超微結構的變化；採用生物化學和生物力學方法檢測各組纖維環的膠原含量、氨基葡聚糖(GAG)含量及力學參數.結果 與對照組比較,HE染色及掃描電鏡可見A、B、C3組均無細胞殘留；A組纖維環超微結構未見破壞,C組纖維環超微結構可見輕度破壞,B組纖維環超微結構可見明顯破壞.A、B、C3組纖維環膠原含量與對照組比較無統計學差異(P＞0.05),但GAG含量均明顯低于對照組(P＜0.05).A、C兩組的力學參數(極限載荷、極限應力、韌度、彈性模量、斷裂功耗)與對照組無統計學差異(P＞0.05),B組上述力學參數均低于對照組(P＜0.05).結論 Triton X-100組處理後的豬尾椎間盤纖維環無細胞殘留,結構無破壞,基質成分及力學性能保存良好,適閤于構建組織工程纖維環.
목적 탐토불동탈세포처리방법대저미추간반섬유배생물역학특성급조직결구적영향,위구건조직공정섬유배제공실험의거.방법 취신선저미섬유배60개,수궤분위4조,매조15개.Triton X-100조(A조):선장섬유배방입Tris-HC1저삼완충액중진탕48 h,재용TritonX-100、DNase I화RNase A대섬유배탈세포처리；SDS조(B조):장섬유배동융3차,접착용SDS、DNase I화RNase A대섬유배탈세포처리；이단백매조(C조):용함이단백매、DNase I화RNase A적Tris완충액대섬유배탈세포처리；대조조(D조):섬유배불주임하처리.채용HE염색여소묘전경방법,관찰각조탈세포정황이급섬유배초미결구적변화；채용생물화학화생물역학방법검측각조섬유배적효원함량、안기포취당(GAG)함량급역학삼수.결과 여대조조비교,HE염색급소묘전경가견A、B、C3조균무세포잔류；A조섬유배초미결구미견파배,C조섬유배초미결구가견경도파배,B조섬유배초미결구가견명현파배.A、B、C3조섬유배효원함량여대조조비교무통계학차이(P＞0.05),단GAG함량균명현저우대조조(P＜0.05).A、C량조적역학삼수(겁한재하、겁한응력、인도、탄성모량、단렬공모)여대조조무통계학차이(P＞0.05),B조상술역학삼수균저우대조조(P＜0.05).결론 Triton X-100조처리후적저미추간반섬유배무세포잔류,결구무파배,기질성분급역학성능보존량호,괄합우구건조직공정섬유배.
