浙江大学学报(医学版)
浙江大學學報(醫學版)
절강대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2014年
4期
388-396
,共9页
袁娜%辛国宏%左笑笑%黄尚科%王莹%侯磊%秦天洁%赵新汉
袁娜%辛國宏%左笑笑%黃尚科%王瑩%侯磊%秦天潔%趙新漢
원나%신국굉%좌소소%황상과%왕형%후뢰%진천길%조신한
肺肿瘤/诊断%细菌噬菌体%DNA,互补/遗传学%抗原,肿瘤/分析%重组,遗传%早期诊断
肺腫瘤/診斷%細菌噬菌體%DNA,互補/遺傳學%抗原,腫瘤/分析%重組,遺傳%早期診斷
폐종류/진단%세균서균체%DNA,호보/유전학%항원,종류/분석%중조,유전%조기진단
Lung neoplasms/diagnosis%Bacteriophages%DNA,Complementary/genetic%Antigens,neoplasm/Analysis%Recombination,genetic%Early diagnosis
目的:筛选有效的人肺癌早期诊断相关抗原,以提高肺癌的早期诊断水平.方法:构建人早期肺癌cDNA T7噬菌体展示文库;筛选出差异性噬菌体克隆,测序后进行生物信息学分析;最后利用重组cDNA表达文库血清学分析(SEREX)技术对8个差异性噬菌体克隆构建肺癌相关抗原微阵列,分别与肺癌患者和正常人的血清反应,评价各个抗原单独应用与联合应用诊断肺癌的价值.结果:构建的肺癌T7噬菌体展示文库的滴度为3.71×106 pfu/ml,噬菌体数为1.11×106 pfu.cDNA文库的重组率超过90%.筛选出9个差异性噬菌体克隆,测序后发现A42与A83抗原的基因序列相同.生物信息学分析发现8个抗原的基因均为已知基因,除了A64以外,其余与肿瘤均有明确的关系.8个抗原与肺癌患者血清的阳性反应率均高于与正常人血清的阳性反应率,差异均具有统计学意义(均P <0.05).在特异性不低于60%的情况下,各个抗原单独用于肺癌诊断时的灵敏性均低于70%.各个抗原的曲线下面积均低于0.8.而复合抗原诊断肺癌的灵敏性为90.8%,特异性为94.1%,曲线下面积高达0.969.结论:本研究成功构建了库容量大、重组率高、代表性好的人肺癌T7噬菌体展示文库,并筛选到8个肺癌相关抗原.由这8个抗原组成的复合抗原诊断肺癌的灵敏性与特异性均在90%以上,诊断价值较高.
目的:篩選有效的人肺癌早期診斷相關抗原,以提高肺癌的早期診斷水平.方法:構建人早期肺癌cDNA T7噬菌體展示文庫;篩選齣差異性噬菌體剋隆,測序後進行生物信息學分析;最後利用重組cDNA錶達文庫血清學分析(SEREX)技術對8箇差異性噬菌體剋隆構建肺癌相關抗原微陣列,分彆與肺癌患者和正常人的血清反應,評價各箇抗原單獨應用與聯閤應用診斷肺癌的價值.結果:構建的肺癌T7噬菌體展示文庫的滴度為3.71×106 pfu/ml,噬菌體數為1.11×106 pfu.cDNA文庫的重組率超過90%.篩選齣9箇差異性噬菌體剋隆,測序後髮現A42與A83抗原的基因序列相同.生物信息學分析髮現8箇抗原的基因均為已知基因,除瞭A64以外,其餘與腫瘤均有明確的關繫.8箇抗原與肺癌患者血清的暘性反應率均高于與正常人血清的暘性反應率,差異均具有統計學意義(均P <0.05).在特異性不低于60%的情況下,各箇抗原單獨用于肺癌診斷時的靈敏性均低于70%.各箇抗原的麯線下麵積均低于0.8.而複閤抗原診斷肺癌的靈敏性為90.8%,特異性為94.1%,麯線下麵積高達0.969.結論:本研究成功構建瞭庫容量大、重組率高、代錶性好的人肺癌T7噬菌體展示文庫,併篩選到8箇肺癌相關抗原.由這8箇抗原組成的複閤抗原診斷肺癌的靈敏性與特異性均在90%以上,診斷價值較高.
목적:사선유효적인폐암조기진단상관항원,이제고폐암적조기진단수평.방법:구건인조기폐암cDNA T7서균체전시문고;사선출차이성서균체극륭,측서후진행생물신식학분석;최후이용중조cDNA표체문고혈청학분석(SEREX)기술대8개차이성서균체극륭구건폐암상관항원미진렬,분별여폐암환자화정상인적혈청반응,평개각개항원단독응용여연합응용진단폐암적개치.결과:구건적폐암T7서균체전시문고적적도위3.71×106 pfu/ml,서균체수위1.11×106 pfu.cDNA문고적중조솔초과90%.사선출9개차이성서균체극륭,측서후발현A42여A83항원적기인서렬상동.생물신식학분석발현8개항원적기인균위이지기인,제료A64이외,기여여종류균유명학적관계.8개항원여폐암환자혈청적양성반응솔균고우여정상인혈청적양성반응솔,차이균구유통계학의의(균P <0.05).재특이성불저우60%적정황하,각개항원단독용우폐암진단시적령민성균저우70%.각개항원적곡선하면적균저우0.8.이복합항원진단폐암적령민성위90.8%,특이성위94.1%,곡선하면적고체0.969.결론:본연구성공구건료고용량대、중조솔고、대표성호적인폐암T7서균체전시문고,병사선도8개폐암상관항원.유저8개항원조성적복합항원진단폐암적령민성여특이성균재90%이상,진단개치교고.