海洋渔业
海洋漁業
해양어업
MARINE FISHERIES
2014年
5期
437-444
,共8页
黄晓荣%章龙珍%庄平%冯广朋%赵峰%刘鉴毅%张涛%侯俊利
黃曉榮%章龍珍%莊平%馮廣朋%趙峰%劉鑒毅%張濤%侯俊利
황효영%장룡진%장평%풍엄붕%조봉%류감의%장도%후준리
超低温冷冻%中华绒螯蟹%胚胎%线粒体DNA
超低溫冷凍%中華絨螯蟹%胚胎%線粒體DNA
초저온냉동%중화융오해%배태%선립체DNA
Eriocheir sinensis%cryopreservation%embryo%mitochondria DNA
为了解超低温冷冻对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)胚胎线粒体DNA影响,选取细胞分裂期胚胎为研究对象,研究了4种玻璃化液处理和超低温冷冻对胚胎线粒体DNA的影响.结果表明:经过玻璃化液处理和冷冻后,胚胎线粒体上的Cytb基因能被稳定扩增,PCR电泳产物大小约1 600 bp,产物经回收后进行双向测序、比对和校正,获得10条Cytb基因全序列,长度为1 135 bp,其中有5个核苷酸变异位点,1 135 bp的Cytb基因序列一共编码378个氨基酸残基,从ATG第一位起始密码子开始到1 140位终止.经过玻璃化液处理和冷冻后,胚胎线粒体上的COI基因也能被稳定扩增,PCR电泳产物大小约1 600 bp,产物经回收后进行双向测序、比对和校正,获得10条COI基因全序列,长度为1 534 bp,其中有6个核苷酸变异位点,1 534 bp的COI基因序列一共编码511个氨基酸残基,从ATG第一位密码子开始到1 533位终止.经过玻璃化液处理和冷冻后,中华绒螯蟹胚胎线粒体上Cytb和COI基因共有11个位点发生了变异,但不同的玻璃化液处理和冷冻对碱基变异没有影响,发生的碱基变异中存在4种类型,即G→A、A→G、C→T、T→C,变异间只有转换发生,没有颠换发生,这些变异均未引起相应氨基酸残基的变异.
為瞭解超低溫冷凍對中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)胚胎線粒體DNA影響,選取細胞分裂期胚胎為研究對象,研究瞭4種玻璃化液處理和超低溫冷凍對胚胎線粒體DNA的影響.結果錶明:經過玻璃化液處理和冷凍後,胚胎線粒體上的Cytb基因能被穩定擴增,PCR電泳產物大小約1 600 bp,產物經迴收後進行雙嚮測序、比對和校正,穫得10條Cytb基因全序列,長度為1 135 bp,其中有5箇覈苷痠變異位點,1 135 bp的Cytb基因序列一共編碼378箇氨基痠殘基,從ATG第一位起始密碼子開始到1 140位終止.經過玻璃化液處理和冷凍後,胚胎線粒體上的COI基因也能被穩定擴增,PCR電泳產物大小約1 600 bp,產物經迴收後進行雙嚮測序、比對和校正,穫得10條COI基因全序列,長度為1 534 bp,其中有6箇覈苷痠變異位點,1 534 bp的COI基因序列一共編碼511箇氨基痠殘基,從ATG第一位密碼子開始到1 533位終止.經過玻璃化液處理和冷凍後,中華絨螯蟹胚胎線粒體上Cytb和COI基因共有11箇位點髮生瞭變異,但不同的玻璃化液處理和冷凍對堿基變異沒有影響,髮生的堿基變異中存在4種類型,即G→A、A→G、C→T、T→C,變異間隻有轉換髮生,沒有顛換髮生,這些變異均未引起相應氨基痠殘基的變異.
위료해초저온냉동대중화융오해(Eriocheir sinensis)배태선립체DNA영향,선취세포분렬기배태위연구대상,연구료4충파리화액처리화초저온냉동대배태선립체DNA적영향.결과표명:경과파리화액처리화냉동후,배태선립체상적Cytb기인능피은정확증,PCR전영산물대소약1 600 bp,산물경회수후진행쌍향측서、비대화교정,획득10조Cytb기인전서렬,장도위1 135 bp,기중유5개핵감산변이위점,1 135 bp적Cytb기인서렬일공편마378개안기산잔기,종ATG제일위기시밀마자개시도1 140위종지.경과파리화액처리화냉동후,배태선립체상적COI기인야능피은정확증,PCR전영산물대소약1 600 bp,산물경회수후진행쌍향측서、비대화교정,획득10조COI기인전서렬,장도위1 534 bp,기중유6개핵감산변이위점,1 534 bp적COI기인서렬일공편마511개안기산잔기,종ATG제일위밀마자개시도1 533위종지.경과파리화액처리화냉동후,중화융오해배태선립체상Cytb화COI기인공유11개위점발생료변이,단불동적파리화액처리화냉동대감기변이몰유영향,발생적감기변이중존재4충류형,즉G→A、A→G、C→T、T→C,변이간지유전환발생,몰유전환발생,저사변이균미인기상응안기산잔기적변이.
